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進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒快速純化大量RNA的新方法

閱讀:133          發(fā)布時間:2017-9-1

進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒開發(fā)出一種快速、大規(guī)模純化結(jié)構(gòu)上均一的RNA的新方法。這種方法利用的是弱陰離子交換層析,它省略了上述這些繁瑣的步驟,更快速地純化大量RNA。
    整個過程如下:利用T7 RNA聚合酶對線性的質(zhì)粒DNA進行轉(zhuǎn)錄之后,加入EDTA終止反應(yīng),并直接上樣到DEAE-Sepharose FPLC柱上。zui初的流出液含有T7 RNA聚合酶及rNTP。之后一次洗脫出短的中斷轉(zhuǎn)錄本、期望得到的RNA和質(zhì)粒DNA。RNA的純度和均一性由分子排阻層析來驗證,而蛋白凝膠電泳證實了純化的RNA中不含T7 RNA聚合酶。
    RNA的大量合成一般是利用T7 RNA聚合酶對DNA模板進行體外轉(zhuǎn)錄,不過隨后的純化非常困難且耗時。利用高速液相層析系統(tǒng)(FPLC)的分子排阻層析能夠從RNA產(chǎn)物中有效去除未摻入的NTP、中斷的小轉(zhuǎn)錄本及模板DNA,但是需要多個準備步驟,如酚/Chloroform抽提,以去除T7 RNA聚合酶,以及脫鹽和樣品濃縮。
利用這種新方法,研究人員能夠在4小時內(nèi)純化長度在30-500 nt的體外轉(zhuǎn)錄RNA,RNA的回收率達90%以上。如果單體RNA和低聚RNA有著足夠的電荷差異,那么也能將兩者區(qū)分開。
    此技術(shù)既排除了酚/Chloroform抽提,進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒也不需要對RNA變性,不僅簡單省時,還能省錢。因為同位素標(biāo)記的rNTP能夠很輕松地從柱流出液中回收利用,這樣又能節(jié)省一筆費用。
Acebutolol Hydrochloride    YSRIBIO1677    34381-68-5    125mg    鹽酸醋丁洛爾標(biāo)準品
Acenocoumarol    YSRIBIO1676    152-72-7    200mg    醋硝香豆素標(biāo)準品
Acepromazine Maleate    YSRIBIO1675    3598-37-6    250mg    乙酰丙嗪馬來酸鹽標(biāo)準品
Acesulfame Potassium    YSRIBIO1674    55589-62-3    200mg    安賽蜜標(biāo)準品
Acetaminophen    YSRIBIO1673    103-90-2    400mg    對乙酰氨基酚標(biāo)準品
Acetazolamide    YSRIBIO1672    59-66-5    2g    乙酰唑胺標(biāo)準品
Acetohexamide    YSRIBIO1671    968-81-0    250mg    醋磺環(huán)已脲標(biāo)準品
Acetohydroxamic Acid    YSRIBIO1670    546-88-3    200mg    乙酰氧肟酸標(biāo)準品
Sumatriptan     YSRIBIO167    103628-46-2     50mg    舒馬曲坦標(biāo)準品
Acetone    YSRIBIO1669    67-64-1    1.5ml×3ampules    丙酮
進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

 

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