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產(chǎn)品名稱：原代卵巢癌*培養(yǎng)基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）
產(chǎn)品說明：原代卵巢癌*培養(yǎng)基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）是一種為促進人源卵巢癌原代細胞體外生長而開發(fā)的培養(yǎng)基。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng)，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系，在5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中平衡時，pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個理想人源卵巢癌原代細胞體外培養(yǎng)環(huán)境，選擇性地促進體外人源卵巢癌原代細胞的生長。

產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養(yǎng)成功率高

(2) 體外持續(xù)擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結果宇臨床數(shù)據(jù)接近

使用說明：
?使用前準備
（1）預冷的DMEM/F12培養(yǎng)基稀釋基質膠（Corning#356231）（50倍稀釋，現(xiàn)配現(xiàn)用），并取適量*覆蓋培養(yǎng)容器，在5%CO2、37℃培養(yǎng)箱中包被培養(yǎng)容器底部0.5~3h，使用時棄上清。
（2）15mL無菌離心管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面75%酒精消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min。
（3）提前30min從4℃冰箱取出*培養(yǎng)基平衡至室溫。
?卵巢癌原代細胞培養(yǎng)
（1）至少提前半小時使用稀釋后的基質膠預鋪培養(yǎng)瓶/板，使用前吸棄基質膠，用稀釋液潤洗一遍。
（2）將分離并計數(shù)后的細胞懸液參考表1中細胞數(shù)量接種于培養(yǎng)瓶/板，補加*培養(yǎng)基至所需體積，輕輕搖晃混勻，75%酒精表面消毒后置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
（3）原代細胞初次接種后2-3天內勿動（利于細胞貼壁），第一次換液建議換半液。

?卵巢癌原代細胞傳代
（1）鏡下觀察細胞形成克隆，且匯合度達到85~95%時即可傳代。
（2）培養(yǎng)箱中取出細胞，棄舊培養(yǎng)液，0.05%胰酶洗滌5秒后吸盡，再加入適量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5 min后拿出輕拍培養(yǎng)瓶/板側面，顯微鏡下觀察細胞消化情況。
（3）細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用原代細胞終止培養(yǎng)基終止消化，并將細胞轉移至離心管中，1500 rpm, 3 min。
（4）棄上清，以1-5mL條件培養(yǎng)基重懸細胞，活細胞計數(shù)，將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養(yǎng)瓶/板，（不同規(guī)格培養(yǎng)瓶/板底面積、接種原代細胞數(shù)量如表1所示），補加培養(yǎng)基至所需體積，十字交叉混勻，培養(yǎng)容器75%表面消毒后置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。其他步驟同上。
注意事項：