商品介紹:
Cladribine是腺苷脫氨酶(adenosine deaminase)抑制劑,可作用于毛細(xì)胞白血病和多發(fā)性硬化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):4291-63-8 別名:2-Chloro-2′-deoxyadenosine;CldAdo;2CdA 純度:99.89% 分子量:285.69 儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA Kit英文名稱:FcεRⅡ ELISA Kit組織蛋白A抗體包裝5g
G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)ELISA Kit英文名稱:GPR120 ELISA KitCD34抗體包裝1g
G蛋白偶聯(lián)雌激受體1(GPER)ELISA Kit英文名稱:GPER ELISA Kit周期D3抗體包裝100g
G蛋白β1(GNβ1)ELISA Kit英文名稱:GNβ1 ELISA Kit緊密連接蛋白1抗體(C端)包裝25g
Gremlin1蛋白(GREM1)ELISA Kit英文名稱:GREM1 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體包裝500g
GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)ELISA Kit英文名稱:GATA2 ELISA Kit核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝1g
F-框亮豐富重復(fù)蛋白3(FBXL3)ELISA Kit英文名稱:FBXL3 ELISA Kit磷化鈣介質(zhì)抗體包裝25g
FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)ELISA Kit英文名稱:FKBPL ELISA Kit7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框26抗體包裝5g
E選擇(SELE)ELISA Kit英文名稱:SELE ELISA Kit衰變加速因子CD55抗體包裝5g
Endoglin蛋白(ENG)ELISA Kit英文名稱:ENG ELISA KitCD59抗體包裝25g
EglNine同源物1(EGLN1)ELISA Kit英文名稱:EGLN1 ELISA Kit畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端)包裝5g
EGF樣域蛋白7(EGFL7)ELISA Kit英文名稱:EGFL7 ELISA Kit鈣激活蛋白14抗體包裝25g
EB病毒誘導(dǎo)蛋白3(EBI3)ELISA Kit英文名稱:EBI3 ELISA Kit角蛋白18抗體(C端)包裝5g
E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)ELISA Kit英文名稱:EP300 ELISA Kit7型膠原抗體包裝5mg
E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA Kit英文名稱:CREG1 ELISA Kit磷化β 連環(huán)蛋白抗體包裝1g
: HBUM70097資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR乙型肝炎病表面抗體試劑盒異蓮心堿;Isoliensinine
金頂側(cè)耳(榆黃蘑)Pleurotus│citrinopileatus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙型肝炎病X抗原試劑盒原阿片堿;protopine
鮑曼不動(dòng)桿菌Acinetobacter│baumanii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,牛或羊膽汁,培養(yǎng)基用乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白試劑盒異甜菊 ;isosteviol
adenosine deaminase抑制劑(Cladribine)唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集14抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(P)Human, Rat
分泌受體抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(P)Human
肌聚多糖-β抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(P)Human, Mouse
磷化非受體型酪蛋白激抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(P)Human, Mouse, Rat
磷化非受體型酪蛋白激抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(RG)(REQUEST QUOTE)Human
分泌型免疫球蛋白A抗體薯蕷皂甙 DIOSCIN(RG)Human, Mouse, Rat
S期激相關(guān)蛋白2抗體DIFORMYLBENZOYLADENOSINE, 3,4-(P)(PLEASE CALL)Human, Rat
蛇蛋白抗體(中華眼鏡蛇)L-(+)-二酯 DIMETHYL-L-TARTRATE, (+)-(RG)Human, Mouse, Rat
硒蛋白W抗體4,4-二-2-戊 DIMETHYL-2-PENTANONE, 4,4-(P)Human