大鼠胚肺成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胚肺成纖維細胞分離自胚肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胚肺成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胚肺成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液   人少突膠質前體細胞裂解物HOPCL  肝竇內皮細胞Many   豬晶狀體上皮細胞PlEpiC  H1299   人肺腺癌細胞  P19 小鼠畸胎瘤細胞 兔原代子宮內膜上皮細胞 大鼠原代胰腺星狀細胞

CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)

CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白

LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein

VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標簽)

PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠糖蛋白A33(GPA33)試劑盒 ，英文名： GPA33 ELISA Kit

Mouse glucoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒

RatEsadiol,E2ELISAKit 大鼠雌二醇(E2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHLE(Humanleukocyteexastase)ELISAKit人白細胞彈性蛋白酶

細胞PKC激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCNP大鼠C型尿肽

小鼠25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

大鼠胚肺成纖維原代細胞小鼠高密度脂蛋白(HDL)試劑盒

Human leptin (LEP) ELISA Kit 人瘦素(LEP)試劑盒

HumanleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 人白三烯E4(LTE4)試劑盒 進口分裝

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMAB試劑盒人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)試劑盒

植物性食物樣品處理試劑盒20次

humanansfusionansmittedvirus,TTVELISAKit人輸血傳播病毒/辛型肝病毒((TTV)試劑盒

ACVR1C重組食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端)

NEGR1重組人 NEGR1 蛋白 Protein

CBLC Protein Human 重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標簽)

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標簽)