詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
EPZ015666 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:EPZ015666 產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg EPZ015666是一種有效的PRMT5酶活性抑制劑,IC50為22nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1616391-65-1 純度:98.56% 分子量:383.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
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黑木耳甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體Human TMCC2 ELISA Kit大鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒
大孢枝孢菌15號染色體開放閱讀框58抗體Human TMCO6 ELISA Kit大鼠尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒
大羽須瑚菌淀粉結合域蛋白1抗體Human TMED3 ELISA Kit大鼠尿激(UK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌延伸因子G1抗體Human TMED2 ELISA Kit大鼠尿苷二磷葡萄糖轉移2(UGT2)免疫試劑盒
大腸埃希菌β葡萄糖苷2抗體Human TMEM199 ELISA Kit大鼠尿苷二磷葡萄糖轉移1(UGT1)免疫試劑盒
冬蟲夏草β葡萄糖苷3抗體Human TMED4 ELISA Kit大鼠鳥酰轉移(OCT)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬膠質母瘤相關蛋白GBAS抗體Human TMEM201 ELISA Kit大鼠黏著斑蛋白(VCL)免疫試劑盒
褐囊蜜環(huán)菌紅糖苷α1抗體Human TMEM213 ELISA Kit大鼠黏多糖/糖聚糖免疫試劑盒
鮮綠青霉G蛋白結合蛋白1抗體Human TMEM208 ELISA Kit大鼠腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)免疫試劑盒
黃褐色牛桿菌G蛋白結合蛋白4抗體Human TMEM214 ELISA Kit大鼠腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌G蛋白結合蛋白6體Human TMEM231 ELISA Kit大鼠腦紅蛋白(NGB)免疫試劑盒
Pseudoclavibacter caeni Srinivasan鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體Human PMCH(Pro-MCH) ELISA Kit大鼠腦啡肽(ENK)免疫試劑盒
異常漢遜酵母鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體Human TMEM25 ELISA Kit大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)免疫試劑盒
粟酒裂殖酵母鳥苷環(huán)化激活蛋白3抗體Human TMEM27 ELISA Kit大鼠內脂(visfatin)免疫試劑盒
放射形根瘤菌Rhizobium│radiobacter 質量規(guī)格:分析標準品桑皮苷A
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質量規(guī)格:分析標準品桑辛
: 44605資源名稱: 分枝桿菌 質量規(guī)格:分析標準品,用于高通量質譜,99.9995%丹參酚B酯
PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)赭色栓 5-溴-2-甲氧基吡啶錳超氧化物歧化Elisa
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田無鏈霉 2-羥基-5-吡啶精氨酸Elisa
谷氨酸棒桿 2-甲氧基-3,5-二溴吡啶甘油二酯Elisa
頭狀禿馬勃 化釔雙核精氨酸Elisa
綠黃鏈霉 2-羥基-4-脂多糖;內Elisa
Aeromonas aquariorum 3--2-羥基吡啶磷酸化MEK1;2Elisa
林生毛霉 硫酸釤(III),八水合物磷酸化外信號調節(jié)激Elisa
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密歇根棍狀桿標記亞種 溴化鎘,四水磷酸化真核起始因子結合蛋白1Elisa
甜菜慢生根瘤 硫酸銦磷酸化含ETS域Elk1蛋白Elisa
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欽海特德沃斯氏 納米二氧化鈦錳過氧化氫Elisa
枯草芽孢桿 化鎳磷酸化外信號調節(jié)激1;2Elisa
枯草芽胞桿枯草亞種 溴化鎳磷酸化絲裂原活化蛋白激Elisa