商品介紹:
Mycro3是一種有效的選擇性c-Myc抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:944547-46-0 純度:98.63% 分子量:526.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
c-Myc抑制劑(Mycro 3) | Mycro 3 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
半乳凝1(GAL1)ELISA Kit英文名稱:GAL1 ELISA Kit癌相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364)包裝5g
白細(xì)胞介7(IL-7)ELISA Kit英文名稱:IL-7 ELISA KitB淋巴酪激抗體包裝1g
白細(xì)胞介6(IL-6)ELISA Kit英文名稱:IL-6 ELISA Kit腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體包裝250mg
白細(xì)胞介5(IL-5)ELISA Kit英文名稱:IL-5 ELISA Kit促凋亡BNIP3L蛋白抗體包裝500mg
白細(xì)胞介4(IL-4)ELISA Kit英文名稱:IL-4 ELISA KitBcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體包裝5g
白細(xì)胞介3(IL-3)ELISA Kit英文名稱:IL-3 ELISA KitBCL2樣10促凋亡蛋白抗體包裝1g
白細(xì)胞介27(IL-27)ELISA Kit英文名稱:IL-27 ELISA KitBCL2樣12含脯蛋白抗體包裝200g
白細(xì)胞介21(IL-21)ELISA Kit英文名稱:IL-21 ELISA KitBCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體包裝5g
白細(xì)胞介2(IL-2)ELISA Kit英文名稱:IL-2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體包裝100g
白細(xì)胞介1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA Kit英文名稱:IL-1RA ELISA KitBcl2相互作用蛋白2抗體包裝25g
白細(xì)胞介1β(IL-1β)ELISA Kit英文名稱:IL-1β ELISA Kit癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體包裝500g
白細(xì)胞介1β(IL-1B)ELISA Kit英文名稱:IL-1B ELISA Kit磷化T淋巴受體抗體包裝100g
白細(xì)胞介1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA Kit英文名稱:IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit堿性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體包裝25g
白細(xì)胞介1α(IL-1α)ELISA Kit英文名稱:IL-1α ELISA Kit癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)包裝500g
白細(xì)胞介17(IL-17)ELISA Kit英文名稱:IL-17 ELISA Kit人腦鈉單克抗體包裝1g
?;铣杉易?/span>4抗體干擾α17(IFNα17)LDC1267 是TAM (Tyro3,Axl 和 Mer) 激高效選擇性抑制劑,對 Tyro3/Axl/Mer IC50值分別為<5 nM/8 nM/
c-Myc抑制劑(Mycro 3)絲抑制蛋白激C底物抗原11-O-異丁酰-12-O-乙酰通關(guān)藤甘元B-3-...Human, Mouse
階段特異性胚胎表面抗原-1抗原11-羥柳杉酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
生長抑受體1(SSTR1)抗原11-羰-β-乙酰乳香(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
生長抑受體2抗原12-EpinapellineHuman
生長抑受體3抗原12-O-Tiglylphorbol-13 –isob...Human, Mouse
生長抑受體5抗原13-氧-(9E,11E)-十八碳二烯Human, Mouse
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原14α-羥Sprengerinin CHuman, Mouse, Rat
磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗原15-羥松香(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原16α-Hydroxytrametenolic aci...Human, Mouse, Rat