以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PI3Kδ抑制劑(Acalisib) | Acalisib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Acalisib(GS-9820)是有效的選擇性PI3Kδ抑制劑,IC50為12.7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:870281-34-8 別名:GS-9820;CAL-120 分子量:401.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
小鼠組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒 ,英文名: H2B ELISA Kit
山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒GoatIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
犬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Canine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
英文名稱Mouse17-ANPELISAKit小鼠17-羥-孕同(17-ANP)規(guī)格:96T/48T
腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(EerotoxigenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次
RatFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-23 ELISA Kit
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA檢測試劑盒Rat1,3-βDglucosidaseELISAKit 96T/48T
人Toll樣受體2(TLR2)免疫試劑盒 human TLR2 ELISA Kit
英文名稱MouseHCGELISAKit小鼠絨毛促性腺激素(HCG)規(guī)格:96T/48T
AIL蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
rabbitNervegrowthfactor,NGFELISA試劑盒兔子神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human myosin light chain kinase (MLCK) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒
RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit 兔子白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforai-RV(Humanai-rabiesvirusaibody)ELISAKit人抗狂犬病毒抗體規(guī)格:48T/96T
血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶HMG-COA)合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PI3Kδ抑制劑(Acalisib)SHANK 1 英文名稱: 富含脯酸突觸相關(guān)蛋白SHANK1抗體 0.1ml
ENO1 英文名稱: MYC啟動子結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
鈣結(jié)合蛋白S100A1抗體 anti-S-100A1 0.1ml
Anti-TANK/FITC 熒光素標記TANK抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MK1/2(Ser222) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg