詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
英文名稱:Apocynin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Apocynin是NADPH氧化酶的選擇性抑制劑,IC50是10uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:498-02-2 別名:Acetovanillone 純度:99.86% 分子量:166.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Enterobacter cowanii Inoue et al. 白三烯B4受體2抗體Human PHC2 ELISA Kit尾加壓2(UST2)
惡臭假單胞菌白相關免疫球蛋白樣受體2抗體Human PHD1 ELISA Kit維生K依賴蛋白Z(PROZ)
桃色枝頂孢相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PHD2(Prolyl hydroxylase domain-containing protein 2) ELISA Kit維生K1(VK1)
橘色硬皮馬勃白介1β抗體Human PGK2 ELISA Kit維生H(VH)
Escherichiaβ-乳球蛋白抗體Human PGRMC2 ELISA Kit維生E(VE)
馬克斯克魯維酵母脂質磷磷相關蛋白1/可塑性相關基因3抗體Human PHACTR1 ELISA Kit維生D受體(VD R)
磚紅鐮孢神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體Human PGRMC1 ELISA Kit維生D結合蛋白(DBP)
豬鏈球菌富含亮重復家庭蛋白1抗體Human PHACTR4 ELISA Kit維生D3(VD3)
花蓋紅菇富含亮重復家庭蛋白4抗體Human PHAX ELISA Kit維生D2(VD2)
膠質肉座菌瘦受體抗體(長)Human PHC2 ELISA Kit維生D(VD)
根瘤菌白血病抑制因子抗體Human PHD2(Prolyl hydroxylase domain-containing protein 2) ELISA Kit維生C(VC)
阪崎腸桿菌Nogo受體反應蛋白抗體Human MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) ELISA Kit維生B6(VB6)
細鏈格孢凋亡抑制蛋白抗體Human PHD1 ELISA Kit維生B3(VB3)
木生假絲酵母層粘連蛋白抗體Human PEX5 ELISA Kit維生B2(VB2)
釀酒酵母Lpin1 抗體Human PFDN1 ELISA Kit維生B12(VB12)
GlaciihabitansLpin1 抗體Human PEX5L ELISA Kit維生B1(VB1)
: R248資源名稱: 大腸埃希氏菌 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)柴胡皂苷D
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質量規(guī)格:熒光染料柴胡皂苷C
舟形毛殼chaetomium│cymbiforme 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)柴胡皂苷A
NADPH氧化酶抑制劑(Apocynin)Pantoea eucalypti 2-(2-乙氧基)乙脂肪甘油三酯水解Elisa
傘枝梨頭霉 2--5-脂聯(lián)Elisa
淡青鏈霉 4-丁過氧化物體增殖因子活化受體γElisa
詹氏酸桿 己二酸二甲酯巴貝斯抗體Elisa
黑木耳 己二酸二甲酯雙芽巴貝斯抗體Elisa
大腸埃希 N.N-二甲基對苯二草酸鹽鈣激活中性蛋白1Elisa
貝葉多孔 3-鹽酸鹽新孢子蟲病Elisa
馬賽 2-乙基胰島樣生長因子Elisa
蠟狀芽孢桿 3--1-羥基自由基Elisa
解淀粉芽孢桿 3-溴-1-25羥基維生DElisa
pET-22(b) 4-溴苯肼單鹽酸鹽α半乳糖基抗原Elisa
玫煙色棒束孢 基三苯基溴化膦α半乳糖抗原Elisa
總狀共頭霉 1-苯基-1-丁炔中性粒趨化因子1Elisa
茶藨子葡萄座腔 2,2,2-三氟乙基三氟磺酸酯鈣;鈣調蛋白依賴性蛋白激激2Elisa
短小芽孢桿 對甲苯異酸酯CD3分子Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)