以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
心臟晚期鈉電流抑制劑(GS967) | GS967 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
GS967(GS-458967)是有效地選擇性的心臟晚期鈉電流抑制劑(lateINa),在心室肌細(xì)胞和心臟中的IC50值分別為0.13和0.21μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1262618-39-2 純度:99.80% 分子量:347.22 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit英文名稱:BMP-7 ELISA Kit聚集蛋白抗體包裝100g
骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA Kit英文名稱:BMP-4 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體包裝25g
骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA Kit英文名稱:BMP-2 ELISA Kit磷化腺瘤樣息肉抗體包裝5g
骨成型蛋白15(BMP-15)ELISA Kit英文名稱:BMP-15 ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝25g
骨保(OPG)ELISA Kit英文名稱:OPG ELISA Kit周期后期促進(jìn)蛋白亞基10抗體包裝5g
骨保護(hù)配體(OPGL)ELISA Kit英文名稱:OPGL ELISA Kit周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體包裝25g
骨保護(hù)(OPG)ELISA Kit英文名稱:OPG ELISA Kit腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體包裝5g
谷胱甘肽過氧化(GSH-Px)ELISA Kit英文名稱:GSH-Px ELISA Kit磷化分裂周期蛋白16抗體包裝1g
谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA Kit英文名稱:GAD-Ab-IgM ELISA KitDNA修復(fù)相互作用蛋白抗體包裝5g
谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA Kit英文名稱:GAD-Ab-IgG ELISA Kit脂肪膜相關(guān)蛋白抗體包裝1g
谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)ELISA Kit英文名稱:GAD-Ab ELISA Kit載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體包裝25g
谷脫氫(GDH/GLDH)ELISA Kit英文名稱:GDH/GLDH ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體包裝5g
孤腓肽(OFQ/N)ELISA Kit英文名稱:OFQ/N ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物2抗體包裝1g
鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA Kit英文名稱:Lep IgG ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3B抗體包裝1g
睪(Testoterone)ELISA Kit英文名稱:Testoterone ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3C抗體包裝5g
芳香基硫酯H抗體轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)Raltitrexed is a thymidylate synthase inhibitor with an IC50 of 9 nM for the inh
心臟晚期鈉電流抑制劑(GS967)雙(2-乙)化銨
四化銨
四丁高銨
四丁六氟磷銨
四丁氫氧化銨
四氟銨
四庚化銨
四己化銨
四己溴化銨