11β-HSD2抑制劑(Fluoxymesterone)公司*的產(chǎn)品：Anti-LAP18/stathmin/FITC 熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SPARC/FITC 熒光素標(biāo)記富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

序列相似家族135成員B(FAM135B)ELISA Kit英文名稱：FAM135B ELISA Kit鈣粘蛋白23抗體包裝1g

嗅4(OLFM4)ELISA Kit英文名稱：OLFM4 ELISA Kit色p450 2s1抗體包裝5g

胸腺旁腺(PTMS)ELISA Kit英文名稱：PTMS ELISA Kit角蛋白16抗體包裝100g

胸腺嘧啶核苷磷化(TP)ELISA Kit英文名稱：TP ELISA Kit半胱蛋白蛋白-6抗體包裝25g

胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA Kit英文名稱：TARC ELISA Kitc-fos抗體包裝5g

胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成(TSLP)ELISA Kit英文名稱：TSLP ELISA Kit9號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g

胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)ELISA Kit英文名稱：BRAK ELISA Kit9號染色體開放閱讀框25抗體包裝100ml

興奮性基轉(zhuǎn)運蛋白2(EAAT2)ELISA Kit英文名稱：EAAT2 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框30抗體包裝25ml

信號7A(SEMA7A)ELISA Kit英文名稱：SEMA7A ELISA Kit9號染色體開放閱讀框37抗體包裝500ml

信號3E(SEMA3E)ELISA Kit英文名稱：SEMA3E ELISA Kit9號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g

鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)ELISA Kit英文名稱：ZFHX1B ELISA Kit9號染色體開放閱讀框41抗體包裝25g

鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)ELISA Kit英文名稱：αZGP1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框5抗體包裝5g

心營養(yǎng)樣細(xì)胞因子1(CLCF1)ELISA Kit英文名稱：CLCF1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g

心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3)ELISA Kit英文名稱：FABP3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g

心肌營養(yǎng)1(CT1)ELISA Kit英文名稱：CT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框6抗體包裝500g

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>97%,培養(yǎng)級左右不對稱發(fā)育因子2試劑盒人免疫球蛋白白喉抗體品

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品組織因子途徑抑制物-2試劑盒抗?fàn)钕龠^氧化物抗體

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)組織因子途徑抑制物試劑盒乙型肝炎病表面抗體（Anti-HBs）
11β-HSD2抑制劑(Fluoxymesterone)胎蛋白多肽蝙蝠葛諾林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

人胎蛋白多肽蝙蝠葛蘇林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

β淀粉樣肽1-40（結(jié)構(gòu)改造）扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Rat

β淀粉樣肽29-42(野生型)扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

蛇巴曲扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

溴脫氧尿苷表白樺脂（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

β淀粉樣肽29-40(野生型)表兒茶（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2表兒茶沒食子酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

 β淀粉樣肽（1-16)多肽表告依春（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse