詳細介紹
商品介紹:
ABL127是一個有選擇且共價的蛋白質甲基酯酶1(PME-1)抑制劑,在HEK293T和MDA-MB-231細胞中的IC50值分別為6.4和4.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1073529-41-5 純度:99.63% 分子量:332.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ABL127 | 1mL(10mM)|5mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)ELISA Kit英文名稱:ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白25抗體包裝500mg
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)ELISA Kit英文名稱:CDHE ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體包裝1g
上皮型脂肪結合蛋白(FABP5)ELISA Kit英文名稱:FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體包裝5g
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA Kit英文名稱:BPI ELISA Kit腫瘤/抗原74抗體包裝1g
色胺羥化2(TPH2)ELISA Kit英文名稱:TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白38抗體包裝25g
色胺羥化1(TPH1)ELISA Kit英文名稱:TPH1 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
三葉因子3(TFF3)ELISA Kit英文名稱:TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白42抗體包裝100g
三葉因子2(TFF2)ELISA Kit英文名稱:TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白47抗體包裝25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)ELISA Kit英文名稱:TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白43抗體包裝5g
三磷腺苷(ATP)ELISA Kit英文名稱:ATP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白46抗體包裝1g
三磷肌(IP3)ELISA Kit英文名稱:IP3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白63抗體包裝1g
朊病毒蛋白(PRNP)ELISA Kit英文名稱:PRNP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白54抗體包裝5g
軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)ELISA Kit英文名稱:CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白61抗體包裝100ml
軟骨寡聚基質蛋白(COMP)ELISA Kit英文名稱:COMP ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白8抗體包裝25ml
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)ELISA Kit英文名稱:MFGE8 ELISA Kit神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g
: AS3.2783資源名稱: 泡盛曲霉 質量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)轉化生長因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品轉化生長因子β3試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa;Chikusetsu
普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質量規(guī)格:純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉化生長因子β2試劑盒梓酚;Catalponol
PME-1抑制劑(ABL127)糖尿病相關肽/胰島淀粉樣肽抗體前列腺E2合成(PGES)檢測試劑盒PGES ELISA Kit
血管緊張Ⅱ抗體前列腺E2(PGE-2)檢測試劑盒PGE-2 ELISA Kit
血管緊張Ⅱ受體1抗體前列腺E2(PGE2)檢測試劑盒PGE2 ELISA Kit
血管生成-1抗體前列腺E1(PGE1)檢測試劑盒PGE1 ELISA Kit
膜粘連蛋白5抗體前列腺D2(PGD2)檢測試劑盒PGD2 ELISA Kit
重組膜粘連蛋白5抗體前列環(huán)(PGI2)檢測試劑盒PGI2 ELISA Kit
銜接蛋白α-Adaptin抗體前白蛋白(PA)檢測試劑盒PA ELISA Kit
凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)檢測試劑盒GIP ELISA Kit
凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)葡萄糖調節(jié)蛋白78(GRP78)檢測試劑盒GRP78 ELISA Kit