Aurora A和B抑制劑(TAK-901)公司正在出售的產(chǎn)品：Nanog/FITC 熒光標(biāo)記胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體IgG3-(三氟)芐 98%
NAIF1 protein/FITC 熒光標(biāo)記核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1抗體IgG3-氟-5-(三氟)苯 97%
NAP1 /FITC 熒光標(biāo)記核小體組裝蛋白1抗體IgG虎杖苷 98%
PNAT/NAT2/FITC 熒光標(biāo)記N-酰轉(zhuǎn)移2抗體IgG雙三氟磺酰

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
根瘤菌人縮Bacillus coagulans小鼠白介2受體(IL-2R)

松鼠葡萄球菌人L-乳脫氫Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)

米曲霉人性神經(jīng)鞘磷脂Bacillus coagulans小鼠腎上腺髓質(zhì)(ADM)

綠色木霉人花生四烯5脂加氧Bacillus coagulans小鼠可溶性瘦受體(sLR)

草假單胞菌人5脂加氧Bacillus cohnii小鼠可溶性瘦受體(sLR)

黑曲霉人腺苷環(huán)化1Paenibacillus ehimensis小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)

貓埃菲比體人可溶性腺苷環(huán)化Bacillus diffusus小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)

德?tīng)柌加墟呓湍溉锁B脫羧Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)

中華游動(dòng)球菌人蛋白酪激Bacillus firmus小鼠肝脂(HL)

羊邊蟲（綿羊無(wú)漿體—承德株）人蛋白酪磷Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)

產(chǎn)短桿菌人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Bacillus firmus小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)

枯草芽孢桿菌人多形核白彈性蛋白Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)

木蹄層孔菌人尿激型纖溶原激活物Bacillus firmus小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)

平菇人激肽釋放8Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)

豬鏈球菌人激肽釋放6Bacillus flexus小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)

平菇人果糖1,6二磷縮Bacillus fusiformis小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)

原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體*亮葉耳環(huán)根瘤菌人外周血淋巴細(xì)胞系

相關(guān)蛋白2抗體轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體大花褶傘人張氏肝細(xì)胞

鋅指蛋白BED5抗體暗灰鏈霉菌腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

宮頸癌抑制蛋白4抗體狹檐薄孔菌血管平滑肌細(xì)胞
Aurora A和B抑制劑(TAK-901)冬莖點(diǎn)霉 1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山酮-7-O-葡萄糖苷

卷枝毛霉 β，β’-二甲基烯酰阿寧

副豬嗜血桿 二羥E

纖維纖維微 二氫麻醉椒苫

蠟樣芽孢桿 二氫醉椒

桿狀毛霉 丹葉大黃

相思根瘤 冬綠苷

葡萄座腔 地黃苷D

酵母 地黃苷A

粗狀假絲酵母 γ-倒捻子

鴨疫里氏桿 扁豆堿

皺褶青霉 冬凌草乙

黃曲霉 大黃葡萄糖苷

新城疫病 多舌飛蓬苷

玉蕈屬 丁香樹(shù)脂雙葡萄糖苷