公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PDE5抑制劑(Vardenafil hydrochloride)
英文名稱:Vardenafil hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Vardenafil鹽酸鹽是PDE5抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):224785-91-5 純度:98.62% 分子量:525.06 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
萘乙酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxcarbazepine補(bǔ)體C4b-A蛋白抗體包裝100mg
尼泊金酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxcarbazepine磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝1g
尼泊金酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hypericin磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝5g
尼泊金乙酯;羥乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28抗體包裝100g
尼爾雌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
尼可地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azathioprine陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
尼可占替諾(煙占替諾)標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱: Barnidipine HCl液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體包裝1g
尼羅替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefepime Hydrochloride鈣調(diào)磷B相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
尼麥角林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefepime HydrochlorideCHRAC1蛋白抗體包裝5g
尼美舒利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loxoprofen sodiumATP依賴的解螺旋抗體包裝1g
尼莫地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loxoprofen sodiumX染色體開(kāi)放閱讀框6抗體包裝5g
尼莫地平雜質(zhì)Ⅰ/2,6-二基-4-(3-基)-...英文名稱: Paeonol硫軟骨2抗體包裝1g
尼群地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Paeonol碳化合物磺基轉(zhuǎn)移10抗體包裝5g
尼群地平雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine碳化合物磺基轉(zhuǎn)移11抗體包裝1g
尼索地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liranaftate碳化合物磺基轉(zhuǎn)移12抗體包裝250g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品間粘附分子2試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP5.0間粘附分子1試劑盒L-鼠李糖;L(+)-Rhamnose
: =CBS277.70=ATCC22054資源名稱: 拉森正青霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品性T淋巴相關(guān)抗原4試劑盒松香;Abietic Acid
PDE5抑制劑(Vardenafil hydrochloride)小鼠核因子κB亞p65親和肽異東莨菪內(nèi)酯;異莨菪亭(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人癌標(biāo)志物-CA153異莪術(shù)烯Human, Mouse, Rat
人卵巢癌標(biāo)志物CA125異佛手柑內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠骨橋異佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa異甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人種胎兒球蛋白/胎蛋白異甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠骨特異性性磷B異橄欖樹(shù)脂Human, Mouse, Rat
小鼠游離脂肪異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖(1-4)-...Human, Mouse, Rat
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1異鉤藤(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat