公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Src抑制劑(Saracatinib)
英文名稱:Saracatinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Saracatinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg Saracatinib是一種有效的Src抑制劑,IC50為2.7nM,也抑制EGFRL861Q(IC50=4nM),EGFRL858R(IC50=5nM)和v-Abl(IC50=30nM)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):379231-04-6 別名:AZD0530 純度:99.88% 分子量:542.03 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鏈格孢菌叉頭蛋白O3A抗體Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KIT綿羊白蛋白(Albumin)免疫試劑盒
尖鱗黃傘卵泡相關(guān)蛋白1Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT綿羊γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
(疣孢漆斑菌)成纖維生長(zhǎng)因子受體5抗體Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT綿羊C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒
硬結(jié)桿菌磷化粘著斑激抗體Human ADSSL1 (Adenylosuccinate synthetase isozyme 1) ELISA KIT綿羊5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒
擬盤多毛孢屬磷化粘著斑激抗體Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT綿羊5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌口蹄疫病A型抗體Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊3-硝基酪(3-NT)免疫試劑盒
植物乳桿菌FBXO28蛋白抗體Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT綿羊Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒
釀酒酵母FBXW5蛋白抗體Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT綿羊17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒
土地芽孢桿菌FBXW12蛋白抗體Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT貓
根瘤菌FBXO42蛋白抗體Human AMDHD1 (Probable imidazolonepropionase) ELISA KIT貓腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
貝酵母FasL抗體Human ADIG (Adipogenin) ELISA KIT貓?jiān)屑?孕(PROG)免疫試劑盒
肇慶曲霉原纖維蛋白1抗體Human ARFGEF1 (Brefeldin A-inhibited guanine nucleotide-exchange protein 1) ELISA KIT貓游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌胰腺衍生因子抗體Human FDX1L (Adrenodoxin-like protein, mitochondrial) ELISA KIT貓游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒
煙曲霉性成纖維生長(zhǎng)因子抗體Human ADPRH ([Protein ADP-ribosylarginine] hydrolase) ELISA KIT貓血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體Human RRM2(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2) ELISA Kit貓?zhí)剪?(CA9)免疫試劑盒
假結(jié)合棒桿菌凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體Human ABR (Active breakpoint cluster region-related protein) ELISA KIT貓嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)免疫試劑盒
青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(GC)補(bǔ)骨脂二氫黃
泡波曲霉屬Emericella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)補(bǔ)骨脂定
小菌核菌Sclerotium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品表兒茶
Src抑制劑(Saracatinib)大豆莖潰瘍 1-Boc-3-基-4-吡咯烷酮H5N1Elisa
泛養(yǎng)副球 N-芴甲氧羰基-L-4-苯氨酸脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
百脈根中間根瘤 Fmoc-3-(3-吡啶基)-L-氨酸外脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
赭色擲孢酵母 Z-4-Fluoro-Phe-OHα3S轉(zhuǎn)移Elisa
球形阜孢 4 -(4、5二苯2咪唑基)胰高血糖樣肽1Elisa
枯草芽孢桿 1-溴-2-(二氟甲氧基)苯可溶性白介2受體Elisa
地衣芽孢桿 2-(三氟甲氧基)苯甲同型半胱氨酸Elisa
類干酪乳桿類干酪亞種 3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,8-十三氟辛基烯酸酯卵清蛋白Elisa
嗜鹽喜鹽芽胞桿 2-溴-4-(三氟甲基)吡啶谷轉(zhuǎn)氨Elisa
窄食單胞 4--2-(三氟甲氧基)苯谷草轉(zhuǎn)氨Elisa
串珠鐮孢 3-氨基-5-環(huán)基-1H-吡唑滑液囊支原體抗體Elisa
約氏不動(dòng)桿 2,5-二氟苯肼鹽酸鹽球蛋白Elisa
固氮 3-氨基異噁唑溶血Elisa
韓國(guó)游動(dòng)微 乙酰酮鋯堿性磷酸Elisa
單格孢屬 2-溴-5-苯甲腫瘤壞死因子受體1Elisa