商品介紹:
Lupeol是一種新型雄激素受體抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:545-47-1 別名:Fagarasterol 純度:98.0% 分子量:426.72 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
雄激素受體抑制劑(Lupeol) | Lupeol | 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 ,英文名: NE ELISA Kit
小鼠丙二(MDA)ELISA檢測試劑盒Mousemalondialchehyche,MDAELISAKit 96T/48T
人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)免疫試劑盒 Human Legionella aibody IgG,LP Ab-IgG ELISA Kit
RatactivatedproteinC,APCELISAKit大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞RyR受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISA試劑盒小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit
大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測試劑盒RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)免疫試劑盒 Human SHC/SLP-76 ELISA Kit
英文名稱MouseFIXELISAKit小鼠凝血因子IX(FIX)規(guī)格:96T/48T
Wescodyne實(shí)驗(yàn)室專用消毒劑500毫升/瓶
rabbitplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA試劑盒兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬藍(lán)耳病(PRRS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒
Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAMA(Mouseai-Monocyteaibody)ELISAKIT小鼠抗單核細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96T
血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量檢測試劑盒20次
polyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雄激素受體抑制劑(Lupeol)SLC27A6 英文名稱: 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體 0.1ml
FASTKD1 英文名稱: Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體 Anti-MIP-1α 0.1ml
Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDPK1(Tyr373/376) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
Cygb (cytoglobin) 細(xì)胞球蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg