以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
B-Raf抑制劑 | B-Raf inhibitor | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
B-Raf抑制劑是pyrazine和pyrrolo[2,3-b]pyridine衍生物。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1315330-11-0 分子量:552.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA Kit英文名稱:CIC ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體包裝500g
血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit英文名稱:PF-4/CXCL4 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體包裝1g
血小板因子3(PF-3)ELISA Kit英文名稱:PF-3 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體包裝1g
血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA Kit英文名稱:PDGFsR-α ELISA Kit氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成6G抗體包裝5g
血小板衍生生長(zhǎng)因子CC(PDGF-CC)ELISA Kit英文名稱:PDGF-CC ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體包裝5ml
血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit英文名稱:PDGF-BB ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體包裝100mg
血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit英文名稱:PDGF-AB ELISA Kit型肝炎病核結(jié)合蛋白-1抗體包裝1g
血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)ELISA Kit英文名稱:PDGF-AA ELISA Kit芳香基硫酯K抗體包裝100MG
血小板生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA Kit英文名稱:PDGF ELISA Kit神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體包裝50MG
血小板生成(TPO)ELISA Kit英文名稱:TPO ELISA Kit錨定蛋白G抗體包裝25g
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA Kit英文名稱:GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝5g
血小板活化因子(PAF)ELISA Kit英文名稱:PAF ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體包裝1g
血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)ELISA Kit英文名稱:TSP-1 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)包裝250mg
血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA Kit英文名稱:FDP ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體包裝5g
血纖蛋白原γ鏈(FGG)ELISA Kit英文名稱:FGG ELISA Kit內(nèi)收蛋白抗體包裝250mg
磷化芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體白介2(IL2)XL413 hydrochloride 是一種有效的,選擇性的,ATP 競(jìng)爭(zhēng)性的 Cdc7 抑制劑,IC50 值為 3.4 nM,同時(shí)對(duì) CK2 和 PIM1
B-Raf抑制劑生長(zhǎng)分化因子6抗體林澤蘭內(nèi)酯C(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethyl sulfoxide
嘌呤核苷交換因子GEFT抗體林澤蘭內(nèi)酯D(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethyl sulfoxide
膠漿成熟因子β抗體靈仙新苷 Dimethyl sulfoxide
蛋白偶聯(lián)受體56抗體靈芝(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethyl sulfoxide
腸和大腦特定同源蛋白2抗體靈芝內(nèi)酯B Dimethyl sulfoxide
甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體靈芝A(標(biāo)準(zhǔn)品) 2,2′-Dibromobiphenyl
生長(zhǎng)激釋放激同源盒蛋白1抗體靈芝 B 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt
血型糖蛋白δ抗體靈芝A(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl nicotinate
谷受體1抗體靈芝C2 N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide