EGFR/HER2雙重抑制劑(Pyrotinib)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-JNK1/2/3/FITC 熒光素標(biāo)記抗氨基末端激酶1/2/3抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Recomb Protein A/Gold 金標(biāo)記重組蛋白A(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子 Anti

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸埃希氏菌Saccharomyces cerevisiae

鐮孢菌（加詞待譯）Saccharomyces cerevisiae

奇異硬皮馬勃Saccharomyces cerevisiae

白地霉Saccharomyces cerevisiae

嗜冷居冰菌Saccharomyces cerevisiae

日內(nèi)瓦毛霉Saccharomyces cerevisiae

芽胞桿菌Saccharomyces cerevisiae

球孢鏈霉菌黃色變種Schizosaccharomyces pombe

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

溫特曲霉Schizosaccharomyces pombe

葡萄座腔菌Saccharomyces cerevisiae

大西洋女神菌Saccharomyces cerevisiae

黑木耳Saccharomyces cerevisiae

褐黑口蘑Saccharomyces cerevisiae

醋化醋桿菌奧爾蘭亞種Saccharomyces cerevisiae

海綿假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

小鼠肝生長因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒B遷移基因1抗體人抗磷脂抗體(Apl/APA)蒲公英甾乙酯

小鼠肝生長因子(HGF)免疫試劑盒脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體人抗磷脂抗體(Apl/APA)普洛芬

小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒B7H6蛋白抗體人抗組蛋白抗體(AHA)七葉膽苷XVII

小鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體人抗組蛋白抗體(AHA)七葉樹皂苷B
EGFR/HER2雙重抑制劑(Pyrotinib)SPHK1 英文名稱： 鞘醇激酶1抗體 0.2ml

EGFL8 英文名稱： 表皮生長因子樣蛋白8抗體 0.2ml

磷酸酯酶-2Ac抗體 Anti-PP2Ac 0.1ml

Anti-Survivin/FITC 綠色熒光素標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser376) 磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg