詳細(xì)介紹
一、 實(shí)驗(yàn)步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。
2、稀鹽酸染色:配制1M的鹽酸,置于60℃的烤箱中預(yù)熱。將切片放入已預(yù)熱好的1M的鹽酸中于60℃烤箱中浸染30min,取出切片用常溫的1M鹽酸稍洗一下,蒸餾水洗3遍。
3、雪弗染色:切片入雪弗染液中暗處理60-90min,不水洗;
4、偏重亞硫酸鈉染色:切片直接入偏重亞硫酸鈉浸洗2次,每次2min,流水沖洗5min;
5、固綠染色:切片入固綠染液中10s至2min,無水乙醇三缸脫水。
6、透明封片:切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。
7、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
二、結(jié)果判讀:
核DNA呈紫紅色,細(xì)胞質(zhì)和其他成分呈淡綠色。
三、注意事項(xiàng):
1、雪弗染色前要用蒸餾水洗干凈,染色時(shí)要避光。
2、固綠染色時(shí),要邊染邊看,背景不能太深也不能過淺。
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