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激光聚焦顯微鏡的原理

閱讀:701      發(fā)布時間:2017-11-11
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 激光聚焦顯微鏡是一種高分辨率的顯微成像技術。普通的熒光光學顯微鏡在對較厚的標本(例如細胞)進行觀察時,來自觀察點鄰近區(qū)域的熒光會對結(jié)構(gòu)的分辨率形成較大的干擾。共聚焦顯微技術的關鍵點在于,每次只對空間上的一個點(焦點)進行成像,再通過計算機控制的一點一點的掃描形成標本的二維或者三維圖象。在此過程中,來自焦點以外的光信號不會對圖像形成干擾,從而大大提高了顯微圖象的清晰度和細節(jié)分辨能力。是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數(shù)據(jù)、目前的分子細胞生物學的分析儀器。主要用于觀察活細胞結(jié)構(gòu)及特定分子、離子的生物學變化,定量分析,以及實時定量測定等。
激光共聚焦顯微鏡已經(jīng)發(fā)展為一種結(jié)合了激光技術,顯微光學,自動控制和圖像處理等多種科研成果的高技術工具。是現(xiàn)代微觀研究領域*的利器之一。激光掃描共聚焦顯微鏡的基本工作原理是首先由激光器發(fā)射的一定波長的激發(fā)光,光線經(jīng)放大后通過掃描器內(nèi)的照明針孔光欄形成點光源,由物鏡聚焦于樣品的焦平面上,樣品上相應的被照射點受激發(fā)而發(fā)射出的熒光,通過檢測孔光欄后,到達檢測器,并成像于計算機監(jiān)視屏上。這樣由焦平面上樣品的的每一點的熒光圖像組成了一幅完整的共焦圖像,稱為光切片。

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