高性?xún)r(jià)比液相色譜系統(tǒng)使用時(shí)的常見(jiàn)問(wèn)題
高性?xún)r(jià)比液相色譜系統(tǒng)使用時(shí)的常見(jiàn)問(wèn)題
一、色譜柱中的流動(dòng)相會(huì)排干嗎?
不少用液相色譜做色譜分離試驗(yàn)的人遇到過(guò)這樣的情形:不慎未及時(shí)補(bǔ)充流動(dòng)相,泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了,HPLC系統(tǒng)由此而停止工作了。
事實(shí)上,如果泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干,并不會(huì)造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣,泵也不會(huì)將空氣排入色譜柱。因?yàn)楸弥荒茌斔鸵后w,而不能輸送空氣。相比之下,另一個(gè)更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上液相色譜的色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣,整個(gè)色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生,多半可能只是色譜柱兩端的幾個(gè)毫米變干了,因揮發(fā)掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。即使色譜柱真的變干了,也不一定不可救藥了。可以嘗試用一種*脫氣的、表面張力低的溶劑沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤(rùn)填料表面;已脫氣的溶劑應(yīng)該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。色譜柱大約需要沖一個(gè)小時(shí)或更多的時(shí)間被*浸潤(rùn),恢復(fù)到正常狀態(tài)。
二、如何預(yù)防液相泵的故障?
要保持高性?xún)r(jià)比液相色譜系統(tǒng)中泵的良好操作性能,必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣.下面列出預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施:
1.用高質(zhì)量試劑和HPLC級(jí)溶劑;
2.過(guò)濾流動(dòng)相和溶劑;
3.脫氣;
4.每天開(kāi)始使用時(shí)放空排氣,工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液;
5.不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中;
6.定期更換墊圈;
7.需要時(shí)加潤(rùn)滑油。