詳細介紹
人原代鞏膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基
人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代鞏膜成纖維細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代鞏膜成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用人原代鞏膜成纖維細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
元,肌肉特異性烯醇化酶抗體 | 環(huán)指蛋白190抗體 |
細胞骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體 | 成纖維細胞生長因子受體4抗體 |
細胞表面趨化因子受體1抗體 | 人膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251 |
ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 | 晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 |
酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 | DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L抗體 |
ERBB4 Others Mouse 小鼠 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞;RCBBF |
γ連環(huán)蛋白/Catenin γ , γ鏈接素抗體 | CL-0151MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
白細胞分化抗原CD207抗體 | VEGFA Protein Canine 重組狗 VEGF / VEGFA 蛋白 |
氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體 | MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體 | TPO Others Human 人 Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
外致密纖維蛋白3B抗體 | CLEC5A Others Rat 大鼠 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ZC-7901細胞,草魚吻端細胞 人白血病阿耐藥株,HL-60/Ad細胞 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN | 人原代鞏膜成纖維細胞專用培養(yǎng)基人臍帶間充質(zhì)干細胞總RNAHUMSC NA |
EMT-6 小鼠癌 | HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細胞;Mouse podocyte | 人毛發(fā)基質(zhì)細胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse |
1.使用人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代鞏膜成纖維細胞培養(yǎng)基正常使用。