爾斯布朗病毒PCR檢測試劑盒的相關產(chǎn)品：甲型流感病毒亞型PCR檢測試劑盒Influenza Virus AM2RTPCR丙型流感病毒PCR檢測試劑盒Influenza Virus CRTPCR等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒Isospora spp.PCR豬等孢球蟲通用PCR檢測試劑盒Isospora suisPCR

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

服務流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

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實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。

３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix （2mM）

4 μl     引物1（10pM）

2 μl     引物2（10pM）

2 μl     Taq酶 （2U/μl）

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）

1 μl      加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

公司正在出售的產(chǎn)品：

類固醇5α還原mei2(SRD5a2)重組蛋白英文名稱：Recombina Steroid 5 Alpha Reductase 2 (SRD5a2)物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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N-乙酰轉移mei8樣蛋白(NAT8L)重組蛋白英文名稱：Recombina N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NAT8L)物種：Homo sapiens (Human，人)

內(nèi)β-N-乙?；被咸烟擒誱ei(ENGASE)重組蛋白英文名稱：Recombina Endo Beta-N-Acetylglucosaminidase (ENGASE)物種：Homo sapiens (Human，人)

Nei內(nèi)切核suanmeiⅧ樣蛋白3(NEIL3)重組蛋白英文名稱：Recombina Nei Endonuclease VIII Like Protein 3 (NEIL3)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

Nei內(nèi)切核suanmeiⅧ樣蛋白3(NEIL3)重組蛋白英文名稱：Recombina Nei Endonuclease VIII Like Protein 3 (NEIL3)物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

絲氨suan蛋白mei50(PRSS50)重組蛋白英文名稱：Recombina Protease, Serine 50 (PRSS50)物種：Homo sapiens (Human，人)

絲氨suan/蘇氨suan激mei39(STK39)重組蛋白英文名稱：Recombina Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)物種：Homo sapiens (Human，人)

非ATPmei蛋白mei體26S亞基10(PSMD10)重組蛋白英文名稱：Recombina Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10)物種：Homo sapiens (Human，人)

耦合因子6(CF6)重組蛋白英文名稱：Recombina Coupling Factor 6 (CF6)物種：Homo sapiens (Human，人)
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