大鼠肺泡巨噬原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代結(jié)腸黏膜上皮細胞 BRL(大鼠肝細胞) HCT-116 人結(jié)直腸腺癌細胞 1ml/T75 GLC-82 肺腺癌 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 Human 小鼠原代小腸平滑肌細胞

大鼠肺泡巨噬原代細胞

大鼠肺泡巨噬細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。

產(chǎn)品名稱：大鼠肺泡巨噬細胞

組織來源：肺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬采用PBS灌注結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠肺泡巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒

Rat basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒

HumanelonginELISAKit 人延伸蛋白(elongin)試劑盒 進口分裝

HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒

正常女性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒

小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 96T/48T

Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人軟骨素(CS)試劑盒

HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂肪酶（LPS）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

醇脫氫酶（ADH）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

脂氧合酶（LOX）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒   可見分光光度法   10管/9樣

CD4重組大鼠 CD4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)

ULBP2重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白  Protein

ADSL Protein Human 重組人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人細胞裂解液   NAMALWA(人Butt's淋巴瘤細胞)     IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液   PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 豬原代肺成纖維細胞 小鼠原代髓核細胞

大鼠肺泡巨噬原代細胞Beta-Amyloid (31-35 0.1mgBeta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)

ACPP Protein Human 重組人 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CADM3重組小鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LIFR Protein Rat 重組大鼠 LIFR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TXNL4B重組人 Dim2 / TXNL4B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein