詳細(xì)介紹
大鼠骺軟骨原代細(xì)胞
大鼠骺軟骨細(xì)胞分離自骨骺生長(zhǎng)板;骨骺生長(zhǎng)板位于長(zhǎng)骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對(duì)于長(zhǎng)骨生長(zhǎng)具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形,長(zhǎng)軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見(jiàn)數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Rat Epiphyseal Chondrocyte Cells | 組織來(lái)源 | 生長(zhǎng)板組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7500 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠骺軟骨細(xì)胞
組織來(lái)源:生長(zhǎng)板組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骺軟骨采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤(pán)蛋白(PP)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒
組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒
魚(yú)免疫球蛋白M(IgM)試劑盒
Human collagen aoaibody (CLA) ELISA Kit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒
PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforADRA1A(Mouseadrenergicalpha-1Areceptor)ELISAKit小鼠能a1A受體
血液乙醇脫氫酶IV活性比色法定量試劑盒20次
MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒
豬白介素1(IL-1)ELISAKit ELISA.
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit ELISA.
豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISAKit ELISA.
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit ELISA.
THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)
ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CA12 Others Human 人 CA12 人細(xì)胞裂解液 真皮成纖維細(xì)胞Many CD7 Others Human 人 CD7 人細(xì)胞裂解液 IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) 小鼠原代子宮成纖維細(xì)胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞
大鼠骺軟骨原代細(xì)胞胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)
ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein