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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠滑膜間充質干采用膠原酶消化法和低密度接種法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠滑膜間充質干經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠滑膜間充質干原代細胞 | 組織來源 | 滑膜組織 |
英文名稱 | Rat Synovial Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7913 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠滑膜間充質干細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構，各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎（OA）以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節(jié)的退變?；ぜ毎菢嫵苫拥淖畲蠹毎后w，是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。滑膜細胞主要功能：①滑膜細胞產生潤滑液成分，并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)試劑盒
Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒
HumahromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)試劑盒 進口分裝
HumanCollagenaseTypeII試劑盒人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒
組織ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅢfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISAKitGFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)試劑盒
豚鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
Human dopachrome isomerase (DT) ELISA Kit 人多巴色素異構酶(DT)試劑盒
rabbitCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-Nph(MouseBeta-naphthol)ELISAKit小鼠β萘酚
細菌B1高效液相色譜法定量試劑盒20次
rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
魚類釋放激素 ELISA.
魚類狀腺原酸(T3)ELISAKit ELISA.
魚類(Coisol)ELISAKit ELISA.
魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA.
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)
CD1D & B2M重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 小鼠成年表皮角質形成層細胞 前脂肪細胞Many 主動脈內皮細胞Many 敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 FO 小鼠骨髓瘤細胞 小鼠原代主動脈外膜成纖維細胞 兔原代腦微血管內皮細胞
大鼠滑膜間充質干原代細胞踝蛋白(TLN)重組蛋白 Recombinant Talin (TLN)
ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His & Fc 標簽)
KLRC1重組小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 標簽) Protein
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)
CBR3重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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