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詳細(xì)介紹
小鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞
小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門(mén)至門(mén)的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便，再通過(guò)直腸經(jīng)門(mén)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。
英文名稱 | Mouse Intestinal Mucosal Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7122 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF | 白細(xì)胞介素4誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體 | 膽囊收縮素A受體抗體 |
叉頭相關(guān)結(jié)構(gòu)域包含蛋白1抗體 | 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 |
細(xì)胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體 | 酸化結(jié)蛋白抗體 |
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 | 舞蹈癥相關(guān)蛋白40/8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體 |
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HIMECL | EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人羊膜細(xì)胞;HA | CHN1 Others Human 人 CHN1 / Chimerin 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | RAC1 Others Human 人 RAC1 / MIG5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CM-R007大鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 |
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | SGC7901(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人癌細(xì)胞;MDA-MB-453 | PIGR Others Human 人 PIGR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MDA-MB-231人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS | CD86抗體 |
富含亮重復(fù)元5抗體 | ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
胞漿支鏈氨基酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 | 酸化活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 |
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體 | EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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