詳細(xì)介紹
小鼠骨髓單個(gè)核原代細(xì)胞
小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是(mononuclear cell)單個(gè)核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離。
英文名稱 | Mouse Bone Marrow Mononuclear Cells | 組織來(lái)源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7732 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞
組織來(lái)源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單個(gè)核采用取骨髓、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單個(gè)核經(jīng)過(guò)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6 | 果糖-2,6-二酸酶心肌酶抗體 |
RNA結(jié)合蛋白9抗體 | 細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體 |
0脂酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體 | 蛋白精N甲基4抗體 |
內(nèi)分泌調(diào)節(jié)肽VGF抗體 | 羥化酶抗體 |
鋅指蛋白801抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶23抗體 |
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 | 雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1 |
倉(cāng)鼠源細(xì)胞 管癌細(xì)胞,T-47D細(xì)胞 B6YH4細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞支原體陽(yáng)性 | QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human |
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-prf | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0904 |
NRK 大鼠腎細(xì)胞 | 狗腎細(xì)胞;Super Tube |
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1 卵巢癌細(xì)胞,H08910細(xì)胞 K-562(慢性髓原白血病細(xì)胞) | 小鼠骨髓單個(gè)核原代細(xì)胞蛋白精N甲基4抗體 |
NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | S100B Others Mouse 小鼠 S100B / S100beta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | 小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 | 酸性鞘0脂酶抗體 |
分選連接蛋白7抗體 | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 |
抑制型G蛋白α3抗體 | 半延伸蛋白α抗體 |
跨膜蛋白12抗體 | 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。