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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠毛囊采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠毛囊原代細胞 | 組織來源 | 毛囊組織 |
英文名稱 | Mouse Hair Follicle Cells | 貨號 | YS-01X7325 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠毛囊細胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。毛囊開口起始于皮膚表面，而每個毛囊又和一個或多個腺胞相連。每個腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì)，卻又通過一個共同和毛囊相通連的皮脂腺導(dǎo)管將分泌物運送到皮膚表面排出。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
元生長添加物NGS | 頂端體蛋白10抗體 |
富含蛋白11抗體 | 細胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 |
白血病病毒C亞類受體蛋白FLVCR抗體 | 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體 |
膜糖蛋白CD200抗體 | 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 |
半延伸蛋白α抗體 | 透明質(zhì)酸酶2/酸酶2抗體 |
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | OPCML Others Mouse 小鼠 OBCAM / OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人細胞裂解液 (陽性對照) | ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HPMEC-c 人肺微血管內(nèi)皮細胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Sf9昆蟲卵巢細胞 Sf9 insect ovarian cells GPM-115無血清無蛋白昆蟲細胞懸浮培養(yǎng)基(金普諾安 Cat#GPM001L01) |
CM-H125人腦成纖維細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠毛囊原代細胞有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體 |
FO細胞，骨髓瘤細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 人腦瘤細胞;SF763 |
人胃癌細胞;MGC-803 | IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CSF3 Others Human 人 G-CSF / GCSF 人細胞裂解液 (陽性對照) | 12號染色體開放閱讀框40抗體 |
胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體 | A-375[A375]細胞，惡性黑色素瘤細胞 白血病細胞,Jurk. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431] |
酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體 | 軸突生長誘導(dǎo)因子3抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體136抗體 | CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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