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詳細介紹
小鼠前列腺基質(zhì)原代細胞
小鼠前列腺基質(zhì)細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生，在病理學上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生，是前列腺中常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變，結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段，其生長潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致，終形成前列腺增生?；|(zhì)細胞是器官中結(jié)締組織細胞，起到為器官中實質(zhì)細胞提供支持和營養(yǎng)的作用，成纖維細胞、炎癥細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質(zhì)細胞類型?；|(zhì)細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)前列腺基質(zhì)細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
英文名稱 | Mouse Prostate Stromal Cells | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8527 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠前列腺基質(zhì)細胞
組織來源：前列腺
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠前列腺基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的小鼠前列腺基質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠前列腺基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
HNE3細胞，人鼻咽癌細胞 小鼠淋巴瘤細胞,EL4細胞 CM-H022人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL | 核蛋白p8抗體 |
SYF2蛋白抗體 | 嘧啶cP4501B1抗體 |
螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體 | 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1β（FTβ）抗體 |
細胞分化因子1抗體 | 前列腺素脫氫酶1抗體 |
信號通路Wnt3a抗體 | 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體抗體 |
NCI-N87(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469] |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠細胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細胞，NG108-15[108CC15]細胞 LM8細胞，C3H小鼠骨肉瘤細胞 | 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 |
人牙周膜成纖維細胞HPLF | 牛腎細胞;MDBK |
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5 | 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET |
GC-2spd細胞，小鼠精母細胞 人癌細胞,ZR75-30細胞 前體細胞分化培養(yǎng)基NPCM | 小鼠前列腺基質(zhì)原代細胞蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1β（FTβ）抗體 |
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞 | CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) |
KM小鼠未分化膠質(zhì)瘤瘤株;B22 小鼠破骨細胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠內(nèi)臟脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL |
癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | 碳酸酶12抗體 |
富含亮重復序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體 | N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細胞 |
原癌基因K-ras抗體 | 胞粘蛋白結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
酪蛋白激酶A3受體抗體 | NCI-N87(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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