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詳細介紹
小鼠全骨髓原代細胞
小鼠全骨髓細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細胞即骨髓內(nèi)除紅細胞外的全部細胞。
英文名稱 | Mouse Whole Bone Marrow Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7628 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠全骨髓細胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠全骨髓細胞采用沖洗骨髓、紅細胞裂解法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠全骨髓經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
CFSC-2G細胞，大鼠肝星形細胞 7721(7721肝癌細胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 | 核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR抗體 |
S期激酶活化蛋白DBF4A抗體 | 嘧啶CYP2D1抗體 |
螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體 | 蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
細胞鉀氯離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體 | 前列腺酸性酸酶抗體 |
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體 | 脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白4抗體 |
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標簽) | 小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) |
H9c2細胞，大鼠心肌細胞 人肝癌細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- |
人淋巴成纖維細胞HLF | MCF 7B(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0259BC-020(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
HFF細胞，小兒細胞 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞,SH2細胞 星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基AM | 小鼠全骨髓原代細胞蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
黑色素細胞生長生長添加物MelGS | SPC-A-1細胞，肺腺癌細胞 人口腔癌細胞,HB細胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 |
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB 人輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF |
U-2 OS人骨肉瘤細胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS | 碳酸酶1抗體 |
富含亮重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體 | 人髓母細胞瘤細胞;Daoy |
原癌基因N-Ras抗體 | 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 |
酪蛋白激酶A4受體抗體 | EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標簽) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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