詳細(xì)介紹
小鼠腎小球系膜原代細(xì)胞
小鼠腎小球系膜細(xì)胞分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非?;钴S的細(xì)胞,具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細(xì)胞的主要作用可能有:①收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié),以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率;②支持作用,它填充于毛細(xì)血管袢之間,支持毛細(xì)血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì);④分泌腎素,在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí),系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。
英文名稱 | Mouse Glomerular Mesangial Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7225 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠腎小球系膜細(xì)胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937] | 干擾素α21抗體 |
吡哆醛激酶抗體 | 4號染色體開放閱讀框40抗體 |
腦啡肽抗體 | 減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 |
癌基因c-Raf抗體 | 中間絲蛋白β-synemin抗體 |
酸化c-fos抗體 | 酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 |
LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H4N4 甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) |
Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細(xì)胞;HKC | 豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2 人B淋巴母細(xì)胞,HMy2.CIR細(xì)胞 LⅡ細(xì)胞,KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株 |
CM-H060人支持細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腎小球系膜原代細(xì)胞減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 |
J-111細(xì)胞,單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞,CGM1細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229] | 人腦血管平滑肌細(xì)胞cDNAHBVSMC cDNA |
人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞 | SIRPA Others Mouse 小鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
C4-2(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T] | 鈣調(diào)酸酶B亞基B1抗體 |
電壓門控性鉀通道蛋白Kv1.4抗體 | BRL大鼠Buffalo細(xì)胞,大鼠肝細(xì)胞 SH-SY5Y(母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 |
AFAP1L2抗體 | NDUFA9蛋白抗體 |
GLIS2蛋白抗體 | LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |