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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胎盤絨毛膜原代細(xì)胞 | 組織來源 | 胎盤 |
英文名稱 | Mouse Placental Chorionic Cells | 貨號 | YS-01X8530 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
小鼠胎盤絨毛膜細(xì)胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠胎盤絨毛膜細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HAECL | 胰島素誘導(dǎo)基因2抗體 |
蛋白酪酸酶H1抗體 | 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2C抗體 |
表皮生長因子受體3抗體 | 粒體載體同源蛋白2抗體 |
階段特異性胚胎表面抗原-1抗體 | 軸絲動力蛋白重鏈9抗體 |
1號染色體開放閱讀框105抗體 | 酸化熱休克蛋白27抗體 |
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Lncap clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 AMTN / Amelotin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS2 | CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人小膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 ) 人海馬元 Human | EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MEP1A Others Human 人 MEP1A / PPHA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HEL細(xì)胞，紅白血病細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞系,PG49細(xì)胞 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
CM-H041人直腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠胎盤絨毛膜原代細(xì)胞粒體載體同源蛋白2抗體 |
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞 豬腎細(xì)胞，LL-PK1細(xì)胞 Hs 578Bst(細(xì)胞) | 人腦血管周細(xì)胞HBVP |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B | DPEP1 Others Human 人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT | 軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體（少突膠質(zhì)細(xì)胞） |
電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體 | 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體 | NOTCH調(diào)節(jié)錨蛋白抗體 |
甘丙肽受體2抗體 | TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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