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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠外周血白經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠外周血白原代細(xì)胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Leukocyte Cells | 貨號 | YS-01X7104 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
小鼠外周血白細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細(xì)胞。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細(xì)胞和無粒白細(xì)胞。前者常簡稱為粒細(xì)胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細(xì)胞核；其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞HAMEC | 干擾素alpha 14蛋白抗體 |
孤兒核受體PAR1抗體 | CHX10蛋白抗體 |
紅細(xì)胞生成素受體抗體 | 生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體（真皮源性蛋白2） |
環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體 | 軸絲中鏈動力蛋白抗體 |
Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體（C3b/C4b受體抗體） | 二甲基化組蛋白H3K9抗體 |
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1) | VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / AP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HCST Others Human 人 HCST / DAP10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
細(xì)胞 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H037人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠外周血白原代細(xì)胞生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體（真皮源性蛋白2） |
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Kyse510 人食管癌細(xì)胞 |
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 | THP1-Blue (穩(wěn)定株)人單核細(xì)胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME |
CNPY2 Others Human 人 CNPY2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 整合素αM抗體Integrin αM |
酸化離子通道蛋白Kv1.3抗體 | BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a |
共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體 | 細(xì)胞PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 |
GDNF家族受體α3抗體 GFR α3 | CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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