詳細(xì)介紹
小鼠外周血淋巴原代細(xì)胞
小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血,它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細(xì)胞或未被釋放入循環(huán)的血細(xì)胞。外周血淋巴細(xì)胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡(jiǎn)稱PBL,主要是血液循環(huán)中的淋巴細(xì)胞,由T細(xì)胞和B細(xì)胞組成,其中T細(xì)胞(占70%~80%)和B細(xì)胞(占20%~30%)。
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Lymphocyte Cells | 組織來(lái)源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7625 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠外周血淋巴細(xì)胞
組織來(lái)源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
QGY-7701細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 人宮頸上皮細(xì)胞癌,Ski細(xì)胞 KM小鼠子瘤株;U27 | 核孔蛋白NUP160抗體 |
Toll樣受體8抗體 | 嘧啶P450 2C9抗體 |
脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50) | 低密度脂蛋白抗體 |
性舞蹈病蛋白抗體 | 羥抗體 |
胸肽α1抗體 | 甲精結(jié)合蛋白3抗體 |
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929] | 人肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
OCM-1細(xì)胞,人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 繩狀青霉 小鼠T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49) | ANGPTL5 Protein Human 重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) |
人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC | MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2 |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 | CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
HEL細(xì)胞,人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf | 小鼠外周血淋巴原代細(xì)胞低密度脂蛋白抗體 |
恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1 | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(液) 100ml | 牛源細(xì)胞 |
人胰島β細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 糖基轉(zhuǎn)移酶28家族1抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體 | 人胃平滑肌細(xì)胞HGSMC |
原鈣粘蛋白β4抗體 | 表皮源性蛋白6抗體 |
酪酶相關(guān)蛋白1抗體 | 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929] |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。