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小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7181 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞 英文 5637 RM-1 恒河猴皮膚細(xì)胞 1ml/T75 CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 大鼠原代冠狀動脈平滑肌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細(xì)胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。

英文名稱

Mouse Small   Intestine Mucosal Epithelial Cells

組織來源

小腸組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X7181

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

組織來源:小腸組織

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠小腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

人正常細(xì)胞;Hs 578Bst

5-三酸肌醇受體1抗體

前列腺素F2a/PGF2 α抗體

腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體

轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

原活化蛋白激酶激酶2抗體

酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體

DCAF13蛋白抗體

緊密連接蛋白1抗體

長鏈烯脂酰A脫氫酶抗體

大鼠腹部脊髓元(RVSCI)(1×106)

CD97 Others Human CD97 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基UCM

VSIG8 Others Human VSIG8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人人(HEK-a) ( 5×105 ) 小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse

ART4 Others Rat 大鼠 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人癌細(xì)胞;MCF7 人角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

TACSTD2 Others Human OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H025人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞原活化蛋白激酶激酶2抗體

CHIT1 Others Human CHIT1 / Chitinase-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

A9 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11

JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞,TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞 兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞,RCFBF細(xì)胞 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞HMMEC

GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

鈣粘蛋白15抗體

DNA修復(fù)酶Ku-80抗體

Promocell C-25020 Hepatocyte   Maienance Medium, 肝細(xì)胞維持培養(yǎng)液 500ml

膜粘連蛋白A3抗體

維甲酸誘導(dǎo)母細(xì)胞瘤蛋白1抗體

β葡萄糖醛酸苷酶抗體

大鼠腹部脊髓元(RVSCI)(1×106)

 


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