培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:LY2228820 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg LY2228820是一種新穎的,有效的p38MAPK抑制劑,IC50值為7nM,但是不會(huì)改變p38MAPK的活化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):862507-23-1 別名:Ralimetinib dimesylate;LY2228820 dimesylate;LY2228820 2MsOH; 純度:99.94% 分子量:612.74 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
土地叢毛單胞菌G蛋白偶合受體激1抗體Human TBCB ELISA Kit大鼠角化生長(zhǎng)因子(KGF)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母促胃泌釋放肽抗體Human TBX21/T-bet ELISA Kit大鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢磷化G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TDGF1(TeRatocarcinoma-derived growth factor 1) ELISA Kit大鼠膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
解烴棒桿菌腦糖原磷化抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit大鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
Fusarium venenatum NirenbergG基丁受體3抗體Human TAP1 ELISA Kit大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌G基丁受體α3抗體Human TBCC ELISA Kit大鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌GEN1蛋白抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
光滑青霉谷酰磷核糖基焦磷?;D(zhuǎn)移Human TBCD ELISA Kit大鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌α-半乳糖苷抗體Human TBCA ELISA Kit大鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌蛋白偶聯(lián)受體55抗體Human TARS2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)免疫試劑盒
香菇生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γHuman TARSL2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌生長(zhǎng)停滯特異性蛋白2家族3抗體Human TAF1L ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢顆粒K抗體Human TAF1 ELISA Kit大鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
灰葡萄孢菌*甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域5抗體Human TAF3 ELISA Kit大鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
球孢白僵菌γ谷酰轉(zhuǎn)移抗體Human TAF6L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白IgG抗體免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母G1基丁A型受體α1抗體Human TAF5L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
構(gòu)巢裸孢殼Emericella│nidulans 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)鹽益母草堿
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)去異波爾定
被孢霉屬Mortierella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品土荊皮乙
p38MAPK抑制劑(LY2228820)磷葡萄糖變位
英文名稱:PGM
其他英文名稱:Phosphoglucomutase;α-D-Glucose-1,6-bisphosphatase;α-D-Glucose-1-phosphate phosphotransferase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,150u/mg,粉末,微生物
包裝:1KU
產(chǎn)品規(guī)格:BR,100-300u/mg,液體,兔肌
包裝:1KU/200U
CAS號(hào):9001-81-4
級(jí)別:BR
分子量:62KDa(SDS-PAGE)
性狀:淡黃色粉末,味腥,有引濕性。是人工養(yǎng)殖的赤子愛勝蚓(Eisenia Foetida Savigny)中提取制備的一組蛋白水解
用途:生化研究。蚓激具有雙重功能,除了直接水解纖溶蛋白外,還能激纖維蛋白溶原成血纖維蛋白溶,從而具有間接水解纖維蛋白的作用。
保存:-20℃