詳細(xì)介紹
化學(xué)結(jié)構(gòu):
5-Carboxy-TET是一種帶有羧基(-COOH)的熒光染料,屬于TET(Tetrachlorofluorescein)系列熒光素。這種化合物結(jié)合了熒光素的光學(xué)特性和羧基的化學(xué)反應(yīng)性,廣泛用于生物化學(xué)和生物研究中,尤其是在熒光標(biāo)記和檢測(cè)方面。
TET:Tetrachlorofluorescein,是一種熒光素,發(fā)出綠色熒光。
COOH:羧基(-COOH)位于分子的5位,用于化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng)。
化學(xué)性質(zhì):羧基具有酸性,可以與堿發(fā)生中和反應(yīng),也可以與胺類或醇類發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)。
結(jié)構(gòu)式:
基礎(chǔ)知識(shí)概述:
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid
英文名:5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid,TET-COOH
分子式:C21H8Cl4O7
分子量:514.1
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
合成方法:
1.羧基化反應(yīng)
從TET出發(fā),通過化學(xué)反應(yīng)引入羧基。例如,使用鹵代酸或酯化反應(yīng)引入羧基。
使用鹵代酸(如溴乙酸)或酯化試劑(如DCC和NHS)。
注意事項(xiàng):
純度標(biāo)準(zhǔn)95%+
保存建議:避免反復(fù)凍融,避光保存,儲(chǔ)液應(yīng)該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究
相關(guān)應(yīng)用:
(1)生物標(biāo)記
蛋白質(zhì)標(biāo)記:
通過羧基與蛋白質(zhì)上的胺基(-NH?)發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),將熒光素標(biāo)記到蛋白質(zhì)上,用于熒光成像或流式細(xì)胞術(shù)。
例如,使用N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯化反應(yīng),將5-Carboxy-TET與蛋白質(zhì)上的胺基結(jié)合。
核酸標(biāo)記:
通過羧基與核酸末端的胺基修飾位點(diǎn)結(jié)合,用于熒光標(biāo)記的核酸探針。
例如,通過酰胺鍵將5-Carboxy-TET連接到核酸的末端。
(2)熒光探針
細(xì)胞成像:
用于標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的生物分子,通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化。
例如,標(biāo)記細(xì)胞膜蛋白或細(xì)胞器蛋白,用于研究細(xì)胞的生理過程。
流式細(xì)胞術(shù):
用于標(biāo)記細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的生物分子,通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行定量分析。
例如,標(biāo)記細(xì)胞表面的受體蛋白,用于檢測(cè)細(xì)胞的活化狀態(tài)。
(3)藥物遞送
藥物偶聯(lián):
通過羧基與藥物分子上的胺基結(jié)合,將藥物分子連接到熒光素上,用于藥物遞送系統(tǒng)的開發(fā)。
例如,將藥物分子與5-Carboxy-TET結(jié)合,用于熒光成像指導(dǎo)的藥物遞送。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
保存條件:應(yīng)密封保存在干燥、避光的環(huán)境中,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
反應(yīng)條件:在進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)時(shí),需要根據(jù)目標(biāo)分子的性質(zhì)選擇合適的反應(yīng)條件(如pH值、溫度、反應(yīng)時(shí)間)。
純化:反應(yīng)后的產(chǎn)品可能需要通過色譜法(如HPLC)進(jìn)行純化,以去除未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物。
應(yīng)用案例:
(1)蛋白質(zhì)標(biāo)記
實(shí)驗(yàn)步驟:
準(zhǔn)備蛋白質(zhì)溶液:將目標(biāo)蛋白質(zhì)溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應(yīng),生成NHS酯。
偶聯(lián)反應(yīng):將活化的5-Carboxy-TET與蛋白質(zhì)溶液混合,室溫孵育1-2小時(shí)。
純化:通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)的染料。
檢測(cè):通過熒光光譜儀或熒光顯微鏡檢測(cè)標(biāo)記效果。
(2)核酸標(biāo)記
實(shí)驗(yàn)步驟:
準(zhǔn)備核酸探針:將核酸探針末端修飾為胺基。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應(yīng),生成NHS酯。
偶聯(lián)反應(yīng):將活化的5-Carboxy-TET與核酸探針混合,室溫孵育1-2小時(shí)。
純化:通過HPLC或凝膠電泳純化標(biāo)記后的核酸探針。
檢測(cè):通過熒光光譜儀檢測(cè)標(biāo)記效果。
相關(guān)試劑(部分):
Carboxy-PEG4-phosphonic acid ethyl ester
MTS-1,5-EDANS-Carboxyethyl
5(6)-Carboxy-X-rhodamine N-Succinimidyl Ester
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane (HCl)
diSulfo-Cy7 carboxylic acid(Ethyl)
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane
Mal-Cyclohexanecarboxylicacid
Carboxy-PEG11-phosphonic acid
Carboxy polymethylene
Carboxy-PEG11-sulfonic acid
2-Carboxyethyl methanethiosulfonate
2-Amino-1,3-bis(carboxylethoxy)propane HCl salt
Carboxy-Amido-PEG5-N-Boc
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid