欧美国产日韩在线免费观看-欧美日韩成人激情一区二区-欧美久久综合一区二区-亚洲av寂寞少妇久久

Bio-Techne
中級會員 | 第7年

400-086-5580

了解一下什么是單細胞全轉(zhuǎn)錄組吧

時間:2019/12/11閱讀:271
分享:
   單細胞全轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)是在單細胞水平對全轉(zhuǎn)錄組進行擴增與測序的一項新技術(shù)。MALBAC(Multiple Annealing and Looping Based Amplification Cycles,簡稱MALBAC),即多次退火環(huán)狀循環(huán)擴增技術(shù)是該領(lǐng)域的先進技術(shù),相關(guān)文章發(fā)表于《科學》(Science)。

  單細胞全轉(zhuǎn)錄組技術(shù)是在單細胞水平對全轉(zhuǎn)錄組進行擴增與測序的一項新技術(shù)。其原理是將分離的單個細胞的微量全轉(zhuǎn)錄組RNA進行擴增后進行高通量測序。

  對單個細胞轉(zhuǎn)錄組的分析由Brady等和Eberwine等分別利用基于PCR技術(shù)的對單個細胞cDNA的指數(shù)擴增和基于T7RNA連接酶體外轉(zhuǎn)錄(invitrotranscription)的線性擴增進行了初步的探索。2006年,Kurimoto等改進了單細胞cDNA擴增方法,將定向的PCR擴增與線性擴增相結(jié)合,對單個ESC進行了單細胞cDNAmicroarray分析,在高覆蓋率和準確性的前提下,使基因表達的代表性和再現(xiàn)性都有了明顯的提高。而隨著測序技術(shù)的發(fā)展,Tang等將單細胞cDNA擴增技術(shù)和新一代測序技術(shù)相結(jié)合而*創(chuàng)立的單細胞RNA測序分析應用于單個小鼠的卵裂球,終發(fā)現(xiàn)了芯片未檢測到的5200多個基因和1800個可變剪切點。

  相比而言,單細胞cDNAmicroarray分析技術(shù)成熟,成本低廉,尤其適用于分析已知基因上調(diào)或下調(diào)的一般轉(zhuǎn)錄信息,但是該系統(tǒng)相對比較封閉,對于未知基因的檢測無能為力,并且不能提供mRNA的確切長度和序列;

  而單細胞RNA測序則是一個開放的系統(tǒng),能夠提供更加詳細和準確的轉(zhuǎn)錄信息,尤其可對未知基因的轉(zhuǎn)錄進行檢測,但是該方法價格昂貴,并且對于結(jié)果的分析需要強大的計算機系統(tǒng)提供保障。

  哈佛大學謝曉亮院士推出基于MALBAC技術(shù)的單細胞轉(zhuǎn)錄組擴增技術(shù),可以對單個細胞、單條染色體或者0.5皮克的RNA進行高保真擴增,并且已經(jīng)進行了商業(yè)化運作。

  發(fā)展的單分子測序技術(shù)無需逆轉(zhuǎn)錄酶和擴增步驟,但測序錯誤率高。我們相信隨著技術(shù)發(fā)展這些局限性會逐步優(yōu)化和改進。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言