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Lonza 4d-Nucleofector X小體積轉(zhuǎn)染應(yīng)用分享!

2023-11-2  閱讀(273)

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4D-Nucleofector® X Unit 是4D-Nucleofector®系統(tǒng)四個(gè)功能模塊之一,用于2 × 104到2 × 107細(xì)胞量的轉(zhuǎn)染,X模塊中不同的電極模式(電極板或電極條)可選用相同的電轉(zhuǎn)程序,系統(tǒng)可自動(dòng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù),客戶無需進(jìn)行額外操作,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的方便性與靈活性大化。

4D-Nucleofector® X Unit 特點(diǎn)

1.4D Nucleofector 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)X模塊可同時(shí)轉(zhuǎn)染2個(gè)100μL電極杯或1個(gè)16孔電極板條(每孔20μL)。

2.電極杯和電極板條可以選用相同的電轉(zhuǎn)程序。

3.每個(gè)電轉(zhuǎn)杯、每個(gè)孔可獨(dú)立設(shè)置程序。

4.操作簡(jiǎn)單靈活。

1)20ul與100ul)使用相同的操作手冊(cè)。

2)100ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最多可達(dá)2 x 107。

3)20ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最少到2 x 104。

5.通量多元化。

1)細(xì)胞通量的1-16個(gè)樣。

2)可預(yù)設(shè)50個(gè)以上參數(shù),針對(duì)100ul 體系。

3)可根據(jù)您的要求選擇20ul體系減少試劑費(fèi)用支出。

6.轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞。

1)5種試劑盒可覆蓋所有原代細(xì)胞類型。

2)轉(zhuǎn)染優(yōu)化實(shí)驗(yàn)更加簡(jiǎn)易便宜(如果您的細(xì)胞在數(shù)據(jù)庫(kù)中沒有需要自行優(yōu)化)。

應(yīng)用案例分享

一,原代小鼠和人T細(xì)胞的KO




1.小鼠和人類T細(xì)胞中CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因KO效率高達(dá)90%以上

2.各種細(xì)胞表面受體(CTLA4,PD1),TF和細(xì)胞因子的KO

3.可以以類似的效率生成雙基因KO

二,原代人T細(xì)胞的KI




1.激活2d后進(jìn)行電轉(zhuǎn),CD3/28

2.90 g,10 min

3.Solution P3,4D 96 well unit

4.EH 115

5.one million T cells/20 μL

6.2.5 μL RNP(50 pmol)+2μL HDR(4 μg)



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