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Chaselection D-熒光素鉀鹽在體外生物發(fā)光、體內(nèi)活體成像的檢測方法!

2024-1-25  閱讀(224)

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一、體外生物發(fā)光檢測

1. 將細(xì)胞鋪在 24 孔黑孔板上,鋪板密度為 0.5-2.0×105 個(gè)細(xì)胞/孔,37℃,培養(yǎng)過夜。

2. 用超純水配制 15 mg/mL 的 D-螢光素儲(chǔ)存液 (100×)。

注:D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,也可分裝后-20℃ 避光凍存,有效期 1 個(gè)月。

3.用預(yù)熱好的細(xì)胞培養(yǎng)基 1: 100 稀釋儲(chǔ)存液,配制終濃度 150 μg/mL 的 D-螢光素工作液 (1×)。

4. 去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。

5.向細(xì)胞內(nèi)添加 1×D-螢光素工作液后,立即進(jìn)行圖像分析。



二、小鼠活體成像檢測

1.用無菌的 DPBS (no Mg2+、Ca2+) 配制 15 mg/mL 的 D-螢光素溶液,0.2 μm 濾膜過濾除菌。

注:D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配,也可分裝后 -20℃ 避光凍存,有效期 1 個(gè)月。

2. 按 150 mg/kg 劑量和 10 μL/g 注射體積向每支小鼠注射相應(yīng)量的 15 mg/mL D-螢光素溶液。

3.腹腔或靜脈注射 5-15 min 后進(jìn)行活體成像分析。




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