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賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司

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賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)

2024-7-24  閱讀(254)

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賽多培®培養(yǎng)基系列再添新成員——增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


      賽爾瑞成在培養(yǎng)基領域持續(xù)深耕,研究領域涵蓋細菌及細胞治療用相關細胞培養(yǎng)基及配套試劑的開發(fā),陸續(xù)推出了大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基、人γδT細胞擴增試劑盒、人T細胞擴增試劑盒、大腸桿菌專用破菌液、超級核酸酶等以“賽多培"為品牌的系列產(chǎn)品,在科研和工業(yè)領域得到了廣泛應用。近期,基于客戶的需求和賽爾瑞成技術團隊在大腸桿菌發(fā)酵領域的經(jīng)驗,公司技術團隊在張眾博士的帶領下,開發(fā)出了賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基"和“賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)"兩款產(chǎn)品。


一、賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基


       傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種應用廣泛和普通的細菌基礎培養(yǎng)基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機鹽。賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基是賽爾瑞成在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎上改良而來,能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度,提高目的蛋白表達量數(shù)倍。

       使用賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基進行大腸桿菌培養(yǎng)時,流程與傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基使用方法一致,與“賽多培®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基"有所區(qū)別的是,賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基仍需添加IPTG進行目標蛋白的誘導表達。


應用案例


1. 大腸桿菌DH5α培養(yǎng)對比結果
       以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基,37°C,180rpm培養(yǎng):

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養(yǎng)對比結果
       以含有質粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達蛋白O)。以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng):

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導表達培養(yǎng)對比結果
       以含有質粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種(該菌種表達蛋白O)。以1: 1000比例轉種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng),至OD600=1時,加入IPTG(終濃度1mM)誘導表達外源蛋白,繼續(xù)37°C培養(yǎng):

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


結論:在本次培養(yǎng)基和誘導表達條件下,O蛋白在賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基中的表達總量明顯高于傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基。


產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

目錄價格

價格

賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基

PR0301

500 mL

85

買二送一

PR0302

10 L

640

買二送一

PR0303

10×10 L

2760

買二送一

注:截止到2024年8元31日


二、賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


       賽爾瑞成新推出的“賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)"是一種在噬菌體污染環(huán)境中仍能夠進行微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基添加劑,有效預防微生物發(fā)酵時噬菌體污染帶來的損失。噬菌體是一類侵害細菌(包括放線菌)的病毒,又稱細菌病毒,由于它的個體比細菌小數(shù)百倍,可以附著于塵埃上隨風飄移,因此能長久地擴散和傳播到一定的范圍,并能脫離寄主而存活。它在寄主細胞內能大量迅速繁殖子代噬菌體,如在十幾分鐘至一個小時左右,一個細胞感染一個噬菌體后可以釋放出數(shù)十個至數(shù)百個子代噬菌體。一旦發(fā)生噬菌體污染,會導致發(fā)酵異常、倒罐,使科研和工業(yè)生產(chǎn)遭到嚴重損失。在發(fā)酵工業(yè)中,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵菌浸染噬菌體后,就要從菌種,培養(yǎng)基,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,地溝,污水池,排風口等進行全面的消毒排查,消毒流程十分繁瑣。一般情況下,實驗室或生產(chǎn)線需要暫停發(fā)酵兩周到一個月的時間,嚴重影響實驗和生產(chǎn)進度。

       經(jīng)多次嚴格試驗測試,賽爾瑞成 “賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)"對溫和噬菌體和烈性噬菌體均具備出色的抑制作用,能夠實現(xiàn)菌體的正常生長和蛋白表達,搭配賽多培®增強型LB預混培養(yǎng)基或大腸桿菌保密度表達培養(yǎng)基使用,效果更佳。


應用案例


1. 賽多培®噬菌體抑制劑對溫和噬菌體的抑制作用

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


A:P蛋白表達菌培養(yǎng)24小時;  B:P蛋白表達菌+λ噬菌體共培養(yǎng)24小時;
C:P蛋白表達菌+λ噬菌體+噬菌體抑制劑共培養(yǎng)24小時

序號

A

B

C

OD600

3.3

0.96

2.9





2. 賽多培®噬菌體抑制劑對烈性噬菌體的抑制作用

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)


A:Q蛋白表達菌培養(yǎng)24小時;   B:Q蛋白表達菌+T4噬菌體共培養(yǎng)24小時;
C:Q蛋白表達菌+T4噬菌體+噬菌體抑制劑共培養(yǎng)24小時

序號

A

B

C

OD600

4.05

1.2

3.67






3. 賽多培®噬菌體抑制劑與增強型LB預混培養(yǎng)基聯(lián)合使用效果

賽多培®新品:增強型LB預混培養(yǎng)基和噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)

R蛋白表達菌培養(yǎng)24小時效果對比


結論:賽多培®噬菌體抑制劑搭配增強型LB預混培養(yǎng)基使用,效果更佳。


使用方法


       通常情況下,每升培養(yǎng)基添加 2mL本液體即可顯著發(fā)揮抗噬菌體效果,保障菌體正常生長。


產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

目錄價格

價格

賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)

PR0401

50 mL

450

買二送一

PR0402

200 mL

960

買二送一

注:截止到2024年8元31日









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