*0F`感受態(tài)細胞

*0F` Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:

      
*0F`感受態(tài)細胞基因組:
F´{lacI<sup>q</sup> Tn10 (TetR)} mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1araD139 ?(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
*0F`感受態(tài)細胞背景說明：
   CMbio *0F`菌株來源于*0菌株。將F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子轉入*0菌株，即為*0F`。該F`因子攜帶lacI^q 抑制子，可抑制trc，tac，lac等啟動子下游基因的表達，從而可以用于一些表達毒性蛋白質粒的擴繁。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提取。CMbio *0F 可用于構建克隆，藍白斑篩選（如用于藍白斑篩選，需在培養(yǎng)基中加入IPTG誘導β-半乳糖苷酶基因的表達）實驗，具有四環(huán)素抗性。CMbio High5^TM系列*0F`感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質粒檢測轉化效率>10<sup>7</sup>cfu/μg。
*0F`感受態(tài)細胞操作使用：

1. CMbio *0F`感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激60秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應 抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.  將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱12-16h，時間過長會產(chǎn)生假陽性小菌落。

*0F`感受態(tài)細胞注意事項：

1.  CMbio 感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時 間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2.  混入質?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。