熒光分光光度計的基本原理及構成說明
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質的激發(fā)光,被測的熒光物質在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經過放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當測繪熒光發(fā)射光譜時,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在適當的激發(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜(emission spectrum),簡稱熒光光譜。
熒光分光光度計的構成:
1. 光源:為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜,且在300nm~400nm 范圍內強度幾乎相等,故較常用。
2.激發(fā)單色器:置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
3.發(fā)射單色器:置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4. 樣品室:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排;測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。