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首頁(yè) >> 技術(shù)文章 >> ubiquigent脫輔基化酶-USP5簡(jiǎn)述
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目錄號(hào):64-0002-050
產(chǎn)品大?。?/trans>50克
登錄號(hào):P45974
表達(dá)的殘基:1-858
Certificate of Analysis Size:50克
種類(lèi):人類(lèi)
來(lái)源:E.大腸桿菌表達(dá)
量:50克
儲(chǔ)存:-70攝氏度
Concentration:0.5毫克/毫升
制定:50 mM HEPES pH 7.5、150 mM氯化鈉、2 mM二硫蘇糖醇、10%甘油
分子量:約98千道爾頓
穩(wěn)定性:-70攝氏度下12個(gè)月;根據(jù)需要等分
蛋白質(zhì)序列:登錄號(hào):P45974。有關(guān)完整的蛋白質(zhì)序列信息。
QA;蛋白質(zhì)鑒定:質(zhì)譜證實(shí)。
去泛素化酶分析:通過(guò)測(cè)定熒光的增加來(lái)驗(yàn)證His-USP5的活性,所述熒光的增加是酶催化熒光底物泛素-羅丹明110-甘氨酸產(chǎn)生泛素和羅丹明110-甘氨酸的結(jié)果。比較了His-USP5存在或不存在時(shí)底物的溫育,證實(shí)了His-USP5的去雙堿基化活性。
背景:去泛素化酶(DUBs)調(diào)節(jié)泛素依賴(lài)性信號(hào)通路。DUBs的活動(dòng)包括從前體分子產(chǎn)生游離泛素,在底物降解后再循環(huán)泛素以維持細(xì)胞泛素穩(wěn)態(tài),以及通過(guò)鏈編輯去除泛素或泛素樣蛋白(UBL)修飾以拯救蛋白質(zhì)免受蛋白酶體降解或影響細(xì)胞信號(hào)事件(Komander以及其他人。, 2009).有兩類(lèi)主要的DUB,半胱氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。泛素特異性加工蛋白酶5(USP5)是半胱氨酸蛋白酶家族的成員,人類(lèi)基因的克隆首先由Wilkinson描述以及其他人。(1995).USP5蛋白包含一個(gè)N末端鋅指泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ZNF-UBP)、一個(gè)泛素特異性加工蛋白酶(UBP)結(jié)構(gòu)域(包含活性位點(diǎn)cys和his盒)和兩個(gè)泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA1和uba 2)(Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).ZNF-UBP結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)揭示了一個(gè)深的結(jié)合口袋,其中插入了泛素的C-末端二甘氨酸基序,這解釋了USP對(duì)多泛素近端亞基上未修飾的C-末端的特異性(Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).最近,USP5被鑒定與26S蛋白酶體以及其他已知為UBL相互作用組(Besche)的蛋白質(zhì)相關(guān)以及其他人., 2009).
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