詳細(xì)介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
產(chǎn)品名稱 | Casp-3 elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human Caspase 3, Casp-3 Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實(shí)驗經(jīng)費(fèi)。
金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體
鷹嘴豆芽素ABiochaninA保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體
L-纈氨L- valine保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
轉(zhuǎn)醇酶抗體
異葒草苷、異葒草素Isoorientin, isoorientin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體
葒草苷、葒草素Orientin, orientin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體
異鼠李素Isorhamnetin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體
異鼠李素-3-O-新橙皮苷Isorhamnetin-3-O- new hesperidin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
兔抗?fàn)钕偾虻鞍?/span>
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷Isorhamnetin -3-O-glucoside保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體
水仙苷;異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖Narcissus glycoside; isorhamnetin-3-O- beta-D- rutinose保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%10mg/支
Casp-3 elisa試劑盒CCDC82C19orf52人可溶性凝集素樣化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試盒
CDK5RAP2C19orf55人可溶性間皮素相關(guān)肽(SMRP)免疫試盒
CINPC19orf56人可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)免疫試盒
CDK14C19orf57人可溶性淀粉酶前體蛋白α(sAPPα)免疫試盒
CEACAM19C19orf61人可溶性彈性蛋白段(sELAF)免疫試盒
CDAN1C19orf77人可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 免疫試盒
CEACAM16C1D人可溶性白介素7受體(sIL-7R)免疫試盒 Tau proteinRAB38化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體
TARDBPRAD50化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體
Tenascin CRECQL5化雌激素受體α抗體
TFF3RECQL5化真核翻譯起始因子4B抗體