詳細(xì)介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
產(chǎn)品名稱 | Human Collagenase I elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human Collagenase I Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過久,檢測時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
高烏素訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mgELISAKitforHumanFructose-bisphosphatealdolaseC小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試盒,英文名:IGFBP-4ELISAKit
BOC-D-絲氨酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBOC-D-Serinemethylester潮濕纖維單胞菌Cellulomonasuda大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞
多利培南質(zhì)量規(guī)格:國進(jìn)口Doripenem人胚腎細(xì)胞AAV-293
訂購|咨詢規(guī)格:50mg脂?;D(zhuǎn)移酶2抗體CD28ELISAKitCD28分子(CD28)ELISA試盒
澳洲茄訂購|咨詢規(guī)格:20mg淋巴細(xì)胞抗原抗體Ly6c抗體GADELISAKit谷氨脫羧酶(GAD)ELISA試盒
脫海;Dehydroglauci規(guī)格:20mg訂購|咨詢GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酯訂購|咨詢規(guī)格:1mlELISAKitforHumanHornerin小鼠多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試盒,英文名:VSELISAKit
5-((2R,3R)-2,3-二-7-訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg/vial組蛋白去?;?抗體MOGAT3ELISAKit單酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶3(MOGAT3)ELISA試盒
羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品Carbenicillindisodium西蒙氏檸檬鹽培養(yǎng)基規(guī)格:100g用途:用于腸道菌的檸檬鹽利用試驗(yàn)
拉呋替Lafutidine保存:-20℃規(guī)格:100mgPCID2蛋白抗體
α-三聯(lián)訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg高嗜性粒細(xì)胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體MELKELISAKit母系胚胎亮氨拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試盒
維達(dá)列汀;維格列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRVildagliptin無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員1(WNT1)重組蛋白R(shí)ecombinantWinglessTypeMMTVIntegrationSiteFamily,Member1(WNT1)
?;?Taurine訂購|咨詢規(guī)格:20mg胞漿接頭蛋白Dok6抗體AGERELISAKit晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)ELISA試盒
1-基因訂購|咨詢規(guī)格:20mgELISAKitforHumanATP-bindingcassettesub-familyBmember5小鼠胰島素原(PI)ELISA試盒,英文名:PIELISAKit
Human Collagenase I elisa試劑盒phospho-VAV3(Tyr173)phospho-Src(Tyr418)Fas活化的絲/蘇激酶抗體
VEGFSTAC2脆性組三聯(lián)體抗體
MPP6SOX30纖維母細(xì)胞表面蛋白抗體
VAV3SLAIN1前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體
CHAC1phospho-CHEK1(Ser317)人抗肽(CAMP)免疫試盒
CIDE Aphospho-CDKN2A (Ser140)人抗肽(Attacin)免疫試盒
CIDE Bphospho-CDKN2A (Ser152)人抗巨細(xì)胞病毒(CMV)抗體(IgM)免疫試盒
CRR9phospho-CDKN2A (Ser8)人抗巨細(xì)胞病毒(CMV)抗體(IgG)免疫試盒
C22orf40phospho-CREB-1(Ser129)人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)免疫試盒
CCL26phospho-CSF2RB (Tyr766)人抗酒石性酶5b(TRACP-5b)免疫試盒