詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
產(chǎn)品名稱 | IDUA elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human α-L-iduronidase, IDUA Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
代酰質(zhì)量規(guī)格:AR,≥99.0%Thioacetamide衣芽孢桿菌Bacilluslicheniformis桔青霉Penicilliumcitrinum
麥冬基黃A訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%,10mg大鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試盒,英文名:HEXβELISAKit
度他雄(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品DutasterideMFC培養(yǎng)基/MFCMedium飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗250克國產(chǎn)/進口
2-金剛;2-Adamantan訂購|咨詢規(guī)格:20mg乳腺癌相關(guān)蛋白3抗體G-CSFELISAKit粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試盒
鹽利曲辛(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Melitracenhydrochloride天狼星紅染色試盒茯苓Poriacocos
長梗冬青苷訂購|咨詢規(guī)格:20mg人前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試盒人96T0.312-20ng/mL大鼠CD45分子(CD45)ELISA試盒,英文名:CD45ELISAKit
沃妙林峰鑒別對照品訂購|咨詢規(guī)格:20mgCD3抗體LNELISAKit層粘連蛋白(LN)ELISA試盒
OSU03012質(zhì)量規(guī)格:>98%,有效的重組PDK-1抑制OSU-03012(AR-12)屎腸球菌EnterococcusfaeciumK7M2wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)
D-赤-鞘氨醇-1-鹽質(zhì)量規(guī)格:國進口D-erythro-Sphingosine-1-phosphate人淋巴血管內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
泮托拉唑鈉Pantoprazolesodium保存:-20℃規(guī)格:50mg環(huán)指蛋白170抗體
連翹苷訂購|咨詢規(guī)格:20mgELISAKitforHumanCoagulationfactorXIIIAchain小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試盒,英文名:CCR8ELISAKit
梓酚;Catalpol訂購|咨詢規(guī)格:20mg透明質(zhì)酶2/玻璃酶2抗體TEP1ELISAKit端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)ELISA試盒
辛可尼(標準品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用CinchonidineSK-MES-1(人肺鱗細胞)熱帶假絲酵母Candidatropicalis
羅格列訂購|咨詢規(guī)格:100mg人肌球蛋白調(diào)節(jié)輕多肽9(MYL9)ELISA試盒人96T78-5000pg/mL大鼠胃泌素(GAS)ELISA試盒,英文名:GASELISAKit
IDUA elisa試劑盒UBE2E3phospho-c-Abl (Ser569)叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體
UBE2E2SAM68鐵蛋白抗體
UBE2D4SH3BGRL2FMS樣酪激酶3配體抗體
UBE2D3SCLT1性成纖維細胞生長因子9抗體
CDKL5BCA2人細胞纖維連接蛋白(cFn)免疫試盒
Alpha chimerinBLK人細胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)免疫試盒
CSN7bBAI2人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)抗體免疫試盒
Calcipressin 1/DSCR 1BNIP3L人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)免疫試盒
Calcipressin 3BAG3人細胞色素P450(CYP450)免疫試盒
Centaurin alpha 1BCL2L10人細胞色素c化酶亞基VIB多肽1(廣泛存在)(COX6B1)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。