Jurkat細(xì)胞主要用于研究急性T細(xì)胞白血病的發(fā)病機(jī)制、病理過(guò)程等。由于它源自急性T細(xì)胞白血病患者，其細(xì)胞特性與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，為研究人員提供了良好的體外模型，有助于深入了解白血病細(xì)胞的增殖、分化異常以及相關(guān)基因表達(dá)變化等情況。由于該細(xì)胞具有T細(xì)胞的相關(guān)特性，能夠支持HIV的感染和復(fù)制，科研人員可以利用它來(lái)篩選抗HIV藥物，研究HIV與宿主細(xì)胞之間的相互作用，探索HIV感染后免疫系統(tǒng)的變化規(guī)律等。
Jurkat細(xì)胞的培養(yǎng)與操作注意事項(xiàng)：
-培養(yǎng)條件：需要在特定的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，一般為RPMI -1640培養(yǎng)基，并添加10的胎牛血清(FBS)，以保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子。同時(shí)，要維持適宜的溫度(通常為37℃)、二氧化碳濃度(一般為5)和濕度等環(huán)境條件。
-傳代操作：傳代時(shí)需要注意適當(dāng)?shù)谋壤?，一般按?:3的比例進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞密度過(guò)高或過(guò)低影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。在操作過(guò)程中，要嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，防止細(xì)菌、真菌等污染，因?yàn)橐坏┘?xì)胞被污染，可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，甚至導(dǎo)致細(xì)胞系的特性發(fā)生改變。
-凍存與復(fù)蘇：為了長(zhǎng)期保存，可以采用凍存的方法。凍存時(shí)需要使用合適的凍存液，一般包含DMSO等成分，以保護(hù)細(xì)胞在低溫下的存活。復(fù)蘇時(shí)要注意快速融化，并及時(shí)更換新鮮的培養(yǎng)基，讓細(xì)胞適應(yīng)新的生長(zhǎng)環(huán)境。
Jurkat細(xì)胞的測(cè)定步驟：
1.細(xì)胞培養(yǎng)與準(zhǔn)備
-細(xì)胞復(fù)蘇：從液氮或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴鍋中，輕輕搖動(dòng)使其快速融化。在超凈工作臺(tái)中，將融化的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除凍存液，然后接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中。
-細(xì)胞計(jì)數(shù)：當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至一定密度時(shí)，取適量細(xì)胞懸液，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以確定細(xì)胞濃度。
2.具體實(shí)驗(yàn)測(cè)定
-流式細(xì)胞術(shù)胞內(nèi)染色：計(jì)數(shù)，每個(gè)樣品取2×10?的細(xì)胞于無(wú)血清的RPMI培養(yǎng)基，37℃ Rest處理1h。每組實(shí)驗(yàn)分為0min/2min/5min的樣，分別用100μl的PBS重懸，轉(zhuǎn)移到96孔板。刺激物和細(xì)胞置于37℃水浴鍋或者金屬浴5min預(yù)熱。加入50μl的3×刺激物，37℃孵育固定時(shí)間點(diǎn)后快速加入200μl 4 PFA終止刺激并固定細(xì)胞，輕微吹吸避免細(xì)胞聚團(tuán)，37℃處理15min。
-細(xì)胞增殖檢測(cè)：例如利用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增殖水平時(shí)，將不同濃度的藥物或刺激物與Jurkat細(xì)胞共同培養(yǎng)24h或48h，然后加入CCK-8試劑，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度，以評(píng)估細(xì)胞增殖情況。
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