人乳腺癌細(xì)胞MCF-7保留了多個分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復(fù)合物。MCF7 [MCF-7]細(xì)胞含有Tx-4癌基因；腫瘤壞死因子c可以抑制MCF7 [MCF-7]細(xì)胞的生長，抗雌激素處理MCF7[MCF-7]細(xì)胞能調(diào)變IGFBP'S的分泌。
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
恢復(fù)凍存的細(xì)胞的活性。
2.實(shí)驗(yàn)原理
在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
3.實(shí)驗(yàn)材料
①儀器：CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈臺、離心機(jī)、37℃水浴鍋。
②材料：于液氮中保存的人乳腺癌細(xì)胞MCF-7細(xì)胞凍存管、培養(yǎng)瓶、離心管、移液管，巴斯德吸管、廢液缸、75%酒精棉球、酒精燈、記號筆、鑷子、滅菌細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
③試劑：RPMI1640*培養(yǎng)基。
4.操作步驟
(1)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
①將水浴鍋預(yù)熱至37℃，將培養(yǎng)液預(yù)熱后分裝到培養(yǎng)皿中。
②離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等。
(2)取出凍存管
①根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
②從液氮罐中取出細(xì)胞盒，取出所需的細(xì)胞，同時(shí)核對管外的編號。
(3)迅速解凍
①迅速將凍存管投入已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷地?fù)u動，使管中的液體迅速融化。
②1~2 min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。
(4)制備細(xì)胞懸液
①將復(fù)蘇細(xì)胞直接轉(zhuǎn)入已添加培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)（培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊）。
②第2天（在細(xì)胞貼壁生長24 h前），用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
我們推薦使用尚恩生物MCF7 [MCF-7]（人乳腺癌細(xì)胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-060）作為體外培養(yǎng)MCF7 [MCF-7]（人乳腺癌細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
提供商 |
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 | 下載次數(shù) |
57次 |
資料大小 |
1MB | 資料類型 |
PNG 圖片 |
資料圖片 |
-- | 瀏覽次數(shù) |
1516次 |
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
5
立即詢價(jià)
您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)