重組人 EGFR 活性蛋白

產(chǎn)品貨號：AA10102

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

產(chǎn)品詳情

純度：Greater than 90% as determined by SDS-PAGE.

內(nèi)毒素：Less than 1.0 EU/ug as determined by LAL method.

生物活性：①Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized EGFR at 1 μg/ml can bind Anti-EGFR recombinant antibody, the EC50 of human EGFR protein is 2.867-3.571 ng/ml.②Human EGF protein captured on COOH chip can bind Human EGFR protein, his and Myc tag  with an affinity constant of 11.9nM as detected by LSPR Assay.③Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized EGFR at 1 μg/ml can bind Cetuximab, the EC50 of human EGFR protein is 0.6919-1.047 ng/ml.

基因名：EGFR

Uniprot No.：P00533

別名：Avian erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog; Cell growth inhibiting protein 40; Cell proliferation inducing protein 61; EGF R; EGFR; EGFR_HUMAN; Epidermal growth factor receptor (avian erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog); Epidermal growth factor receptor (erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog avian); Epidermal growth factor receptor; erb-b2 receptor tyrosine kinase 1; ERBB; ERBB1; Errp; HER1; mENA; NISBD2; Oncogen ERBB; PIG61; Proto-oncogene c-ErbB-1; Receptor tyrosine protein kinase ErbB 1; Receptor tyrosine-protein kinase ErbB-1; SA7; Species antigen 7; Urogastrone; v-erb-b Avian erythroblastic leukemia viral oncogen homolog; wa2; Wa5

種屬：Homo sapiens (Human)

蛋白長度：Extracellular Domain

來源：Mammalian cell

分子量：73.6 kDa

表達(dá)區(qū)域：25-645aa

重組人 EGFR 活性蛋白

產(chǎn)品貨號：AA10102

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

蛋白標(biāo)簽：N-terminal 10xHis-tagged and C-terminal Myc-tagged

產(chǎn)品提供形式：Liquid or Lyophilized powder

產(chǎn)品描述：重組人表皮生長因子受體(EGFR)由哺乳動物細(xì)胞表達(dá)，在n端融合10xhis標(biāo)簽，在c端融合myc標(biāo)簽。它含有人類EGFR蛋白25-645個(gè)氨基酸殘基。其蛋白長度覆蓋了EGFR蛋白的胞外結(jié)構(gòu)域。SDS-PAGE檢測該蛋白純度大于90%。LAL法測定重組EGFR蛋白內(nèi)毒素含量小于1.0 EU/ug。重要的是，它已經(jīng)被驗(yàn)證為活動的。在功能性ELISA中，這種EGFR蛋白可以分別與抗EGFR抗體和西妥昔單抗結(jié)合。EC50分別為2.867-3.571 ng/ml和0.6919-1.047 ng/ml。在LSPR實(shí)驗(yàn)中，COOH芯片捕獲的人表皮生長因子可以與該EGFR蛋白結(jié)合，親和力常數(shù)為11.9 nM?，F(xiàn)在有現(xiàn)貨。

EGFR是一種酪氨酸激酶受體，可磷酸化大量細(xì)胞內(nèi)底物，激活導(dǎo)致細(xì)胞生長、DNA合成和癌基因(如Fos和jun)表達(dá)的通路。它在生理?xiàng)l件下調(diào)節(jié)上皮組織發(fā)育和內(nèi)穩(wěn)態(tài)，但在病理環(huán)境下驅(qū)動腫瘤發(fā)生。尤其是肺癌和乳腺癌。EGFR已被確定為實(shí)體腫瘤中最常改變的癌基因之一。

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表達(dá)載體的選擇

據(jù)啟動子的不同這些載體大致可以分為熱誘導(dǎo)啟動子，如λPL，cspA 等，根據(jù)表達(dá)蛋白質(zhì)的類型可分為單純表達(dá)載體和融合表達(dá)載體。

融合表達(dá)是在目標(biāo)蛋白的N端或C端添加特殊的序列，以提高蛋白的可溶性，促進(jìn)蛋白的正確折疊，實(shí)現(xiàn)目的蛋白的快速親和純化，或者實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的表達(dá)定位。

常用的用于親和純化融合標(biāo)簽包括 Poly-Arg，Poly-His, Strep-Tag Ⅱ，S-tag，MBP等。其中His-Tag 和GST-Tag 是目前使用最多的。His Tag 大多數(shù)是連續(xù)的六個(gè)His 融合于目標(biāo)蛋白的N端或C端，通過His 與金屬離子：Cu2+>Fe2+>Zn2+>Ni2+ 的螯合作用而實(shí)現(xiàn)親和純化，其中Ni2+是目前使用*泛的。His 標(biāo)簽具有較小的分子量，融合于目標(biāo)蛋白的N端和C端不影響目標(biāo)蛋白的活性，因此純化過程中大多不需要去除

與His 相比，GST 很多時(shí)候能夠促進(jìn)目標(biāo)蛋白的正確折疊，提高目標(biāo)蛋白表達(dá)的可溶性，因此，對于那些用his 標(biāo)簽表達(dá)易形成包涵體的蛋白，可以嘗試用GST融合表達(dá)來改進(jìn)。當(dāng)然，GST（26kDa） 具有較大的分子量，可能對目的蛋白的活性有影響，因此很多時(shí)候會選擇切除GST。